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基于TEE技術的艾美捷 RmesFect™ CRISPR轉染試劑專為mRNA/gRNA轉染而設計,具有高效率和低毒性的特點。RmesFect™在多種細胞中都是有效的。
OZ Biosciences RmesFect CRISPR轉染試劑特點:
高效:在所有細胞中實現(xiàn)RNA遞送
即用型:無需額外的緩沖液
低核酸量:毒性最小化
保護 RNA 免受降解
與任何培養(yǎng)基兼容
血清兼容:無需更換培養(yǎng)基
與質粒DNA遞送相比,mRNA轉染具有以下優(yōu)勢:
無需核吸收。mRNA翻譯成蛋白質發(fā)生在細胞質中。
蛋白表達速度快于DNA轉染
無基因組整合
以完-全啟動子非依賴的方式表達蛋白質
用于CRISPR Cas9實驗的其他產(chǎn)品:
PolyMag CRISPR用于使用表達質粒進行基因組編輯
ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白遞送
ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的轉導效率
應用:
用于 CRISPR Cas9 基因組編輯實驗
開始之前的重要提示:
? 對于細胞系,在轉染前24小時將細胞接種在96孔板、24孔板或6孔板中分別在150µL、400µL和2 mL完-全培養(yǎng)基中培養(yǎng)板。
? 細胞應該是健康的,并在其指數(shù)生長階段進行檢測。出席者污染物(支原體、真菌)將顯著影響轉染效率。這個必須根據(jù)所使用的細胞和血管來調整最佳匯合。建議使用定期傳代的細胞進行轉染。不要使用已經(jīng)培養(yǎng)時間過長(>2個月)。
? 讓試劑到達RT,并在形成復合物之前輕輕地渦旋它們。
? DNA/RmesFect復合物必須使用不含血清和補充劑的培養(yǎng)基或緩沖液準備培養(yǎng)基如MEM、DMEM或OptiMEM或緩沖液如HBS或PBS建議使用。相反,不建議RPMI用于制備復合物。
? 用去離子水稀釋試劑,稀釋劑量小于1µL,
? 對于一些細胞,轉染后24小時用新鮮的預熱前培養(yǎng)基代替舊培養(yǎng)基,培養(yǎng)基或僅將新鮮的生長培養(yǎng)基添加到細胞中。在細胞非常敏感的情況下轉染前,培養(yǎng)基可以在3-4小時后更換。
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