培養(yǎng)基好比土壤,是組織培養(yǎng)中離體材料賴以生存和發(fā)展的基地。培養(yǎng)基的成分是根據植物生長發(fā)育所需的營養(yǎng)而設計的。它既有植物所需的氮、磷、鉀及鋅、銅、鉬、鐵等元素,同時也包含了對生長發(fā)育起促進和調節(jié)作用的有機物質及植物激素等。加入瓊脂使之凝固的稱固體培養(yǎng)基,沒有瓊脂的滅菌后仍保持液態(tài)的叫液體培養(yǎng)基。成功的組織培養(yǎng),在一定程度上依賴于對培養(yǎng)基的選擇。不同的培養(yǎng)基由于所含無機鹽的量不同,對試驗材料的反應也不會完-全一樣。常用的植物試管苗快繁培養(yǎng)基是不含激素的MS基本培養(yǎng)基,附加2%--3%的蔗糖,用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時再加入0.6%--0.7%的瓊脂,pll 5.6--5.8。MS培養(yǎng)基:Murashige和Skoog丁1962年為煙草細胞培養(yǎng)設計的,其特點是無機鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數量和比例合適,能滿足植物細胞的營養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。
MS培養(yǎng)基是Murashige和Skoog于1962年為煙草細胞培養(yǎng)設計的,其特點是無機鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數量和比例合適,能滿足植物細胞的營養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。 基于此,這種培養(yǎng)基就用他們的名字來命名了。
MS培養(yǎng)基是非常常用的組織培養(yǎng)基,其中已經開發(fā)了許多變體。該培養(yǎng)基起源于懷特的培養(yǎng)基,最初是為種植煙草愈傷組織而開發(fā)的。與白色培養(yǎng)基相比,所有成分的濃度都增加了。增加至50-60mM氮顯著刺激煙草細胞的生長,然而濃度為80mM或更高顯然對細胞不利。所有其他元素的增加,特別是宏觀元素的增加,也刺激了愈傷組織的生長。由于礦物質濃度高,MS培養(yǎng)基是一種非常豐富的鹽水培養(yǎng)基,對某些植物物種來說可能太咸了。為了避免這個問題,MS通常與全濃度的微量元素一起使用,但與作者最初描述的濃度的一半或四分之三的常量元素一起使用。有時,原始的MS維生素被Linsmaier和Gamborg B5培養(yǎng)基的維生素所取代,因為相對于植物對這種維生素的需求,硫胺素的濃度較高。
艾美捷 Murashige & Skoog培養(yǎng)基含維生素#M0222.0050組成:
微量元素 毫克/升 微米
氯化鈷2.6H2O 0.025 0.11
銅酸4.5H2O 0.025 0.10
菲納多達 36.70 100.00
H3博3 6.20 100.27
基 0.83 5.00
錳硫4.H2O 16.90 100.00
那2哞4.2H2O 0.25 1.03
氧化鋅4.7H2O 8.60 29.91
宏元素 毫克/升 毫米
氯化鈣2 332.02 2.99
韓2采購訂單4 170.00 1.25
諾3 1900.00 18.79
鎂硫磺4 180.54 1.50
新罕布-什爾州4不3 1650.00 20.61
維生素 毫克/升 微米
甘氨酸 2.00 26.64
肌醇肌醇 100.00 554.94
煙酸 0.50 4.06
鹽酸吡哆醇 0.50 2.43
鹽酸硫胺素 0.10 0.30
包括維生素在內的微觀和宏觀元素總濃度:4405.19毫克/升
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