二氨基聯(lián)苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是過氧化物酶(POD)的顯色底物,DAB顯色液主要用于免疫過氧化物酶法,適用于辣根過氧化物酶HRP標記的免疫印記或免疫組化反應。過氧化物酶催化底物發(fā)生反應,于反應部位產生棕色沉淀物,免疫印記可直接在膜上顯示條帶;免疫組化標本顯色時間一般為室溫5-20分鐘,隨后在顯微鏡下觀察顯色情況,顯色充分后應將標本及時脫水封固,其終產物可直接在光鏡下觀察,也可經OsO4處理后,增加反應產物的電子密度,用于電鏡觀察。
艾美捷 Biogradetech DAB顯色試劑盒:
中文名稱:DAB顯色試劑盒
英文名字:DAB Substrate Kit (DAB staining)
Biogradetech貨號:B-IMWRS51-100T
規(guī)格:100T
保存建議:DAB顯色試劑盒儲存條件:2-8°C避光
本試劑盒可以用于細胞或組織在免疫組化或原位雜交時結合的辣根過氧化物酶顯色,也可以用于 Western 等結合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測。同時也可以用于細胞或組織內源性的辣根過氧化物酶顯色。
DAB顯色試劑盒使用參考:
1. 對于組織切片或細胞樣品或膜,在與辣根過氧化物酶標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當洗滌 液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。對于檢測內源性辣根過氧化物酶的組織或細胞樣品,在適當固定后,也用適 當洗滌液洗滌3-5次,每次3-5分鐘。
2. 按照1:1的比例將顯色液A、B液混勻,混勻后即配制成DAB染色工作液。
3. 后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入適量DAB染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。
4. 室溫避光孵育3-30分鐘或更長時間(可長達24小時),直至顯色至預期深淺。
5. 去除DAB染色工作液,用蒸餾水洗滌1-2次即可終止顯色反應。
6. 對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色,以便于觀察。對于膜,顯色反應終止后,可以室溫晾干避光保存。
注意事項:
DAB 對人體有害,請注意適當防護。 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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