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內(nèi)切酶EcoRI, 無動(dòng)物源性背景:
經(jīng)過基因工程改造的EcoRI,ADCF,能夠在5~15分鐘內(nèi)消化DNA。它可用于鑒定質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物和基因組。EcoRI,ADCF具有以下特點(diǎn):在5到15分鐘內(nèi)快速消化,極-好的酶活性冗余,易于處理底物過量或具有挑戰(zhàn)性的模板消化。這種酶不含動(dòng)物來源的成分
艾美捷內(nèi)切酶EcoRI, 無動(dòng)物源性:
Cat #: C-BSM2504S
Size: 5000 U
Storage: -20°C
內(nèi)切酶EcoRI, 無動(dòng)物源性組成:
單位定義:
一個(gè)單位定義為在37°C、50µL推薦反應(yīng)緩沖液中1小時(shí)內(nèi)消化1µgλDNA所需的EcoRI量
熱滅活
在80°C下培養(yǎng)20分鐘。
質(zhì)量控制
凈化
SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果大于95%。
核酸內(nèi)切酶殘基
將20U的EcoRI與超螺旋質(zhì)粒DNA在37°C下孵育4小時(shí),DNA電泳中未檢測(cè)到質(zhì)粒的變化。
藍(lán)/白篩選試驗(yàn):
用1μl EcoRI消化含有locZa基因的合適載體。將消化產(chǎn)物連接并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中。在含有X-Gal、IPTG和適當(dāng)抗生素的Luria Bertani培養(yǎng)板上,成功門控的β-半乳糖苷酶基因可以表達(dá)并產(chǎn)生藍(lán)色菌落,而中斷的基因(即降解的DNA末端)產(chǎn)生白色菌落。ADCF限制性內(nèi)切酶必須產(chǎn)生少于1%的白色菌落。
DNA酶殘基
將20U的EcoRI與雙鏈DNA在37°C下孵育16h,DNA電泳未檢測(cè)到DNA的變化。
RNase殘基
將20U的EcoRI與RNA在37℃下孵育1小時(shí),電泳中未檢測(cè)到RNA降解
結(jié)扎和清算
在最佳反應(yīng)溫度下用20U的EcoRI消化后,DNA片段可以在22°C下與T4 DNA連接酶(Fast)連接。在這些連接的片段中,通過瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定,大多數(shù)片段可以用EcoRl重新切割。
宿主DNA殘基:
通過對(duì)大腸桿菌16S rDNA特異性的TaqMan-qPCR檢測(cè)酶溶液中的核酸殘基,檢測(cè)到少于10pg的大腸桿菌基因組殘基。
宿主蛋白殘留:
通過ELISA測(cè)定大腸桿菌宿主蛋白低于50ppm。
無菌:
未檢測(cè)到大腸桿菌。
內(nèi)毒素殘留量:
<10 EU/mg
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