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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>多聚甲醛溶液(4%PFA)--固定效果穩(wěn)定、操作簡單
多聚甲醛溶液,也稱為4%PFA(4% Paraformaldehyde),是一種常用的固定劑,用于固定生物樣本中的細(xì)胞和組織,以保持其形態(tài)和結(jié)構(gòu)。
多聚甲醛是由甲醛分子聚合而成的固體,通過在水中加熱溶解,可以制備成4%PFA溶液。這種溶液在生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、動物組織和器官的固定。
固定樣本的過程中,4%PFA會與細(xì)胞和組織中的蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)反應(yīng),使其固定在原位。這樣可以保持細(xì)胞和組織的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和某些生物分子的空間分布,為后續(xù)的實(shí)驗和分析提供可靠的基礎(chǔ)。
使用4%PFA固定樣本時,一般的操作步驟如下:
1. 準(zhǔn)備4%PFA溶液:將適量的多聚甲醛加入適量的緩沖液(如磷酸鹽緩沖液)中,攪拌溶解,調(diào)節(jié)pH值。
2. 處理樣本:將待固定的細(xì)胞或組織樣本置于4%PFA溶液中,通常需要一定的固定時間,如15分鐘至數(shù)小時,具體時間根據(jù)樣本的大小和類型而定。
3. 清洗:將固定后的樣本用PBS(磷酸鹽緩沖液)或其他適當(dāng)?shù)木彌_液進(jìn)行洗滌,以去除多余的固定劑。
4. 后續(xù)處理:根據(jù)實(shí)驗需求,可以進(jìn)行進(jìn)一步的處理,如切片、染色、免疫標(biāo)記等。
4%PFA固定的優(yōu)點(diǎn)包括固定效果穩(wěn)定、對細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)的保護(hù)較好、操作相對簡單等。然而,需要注意的是,4%PFA固定后的樣本可能對某些抗體或染料的反應(yīng)性有影響,因此,在具體的實(shí)驗設(shè)計中需要綜合考慮使用固定劑的選擇。此外,固定過程中需要注意安全操作,避免接觸和吸入多聚甲醛溶液,以防對人體造成傷害。
艾美捷多聚甲醛溶液(4%PFA)基本參數(shù):
目錄號:A-CSH467
規(guī)格:100mL, 500mL
儲存:在2~8°C的黑暗中儲存(12個月)
多聚甲醛溶液(4%PFA)注意事項:
1.如果該產(chǎn)品長期未使用,其中的醛基可能會氧化成酸,導(dǎo)致溶液pH值降低并影響固定效果。
2.所需的固定時間可能因不同的細(xì)胞或組織樣本而異,應(yīng)根據(jù)細(xì)胞或組織類型和組織塊的大小。
3.盡管聚甲醛的作用溫和,但它會使組織硬化,固定時間過長會導(dǎo)致組織脆性,使其在切片過程中容易斷裂。因此固定時間一般不應(yīng)超過24小時
4.聚甲醛可以在固定的細(xì)胞或組織樣品中長期存在,即使用合適的洗滌液或水洗滌幾個小時后,仍可能殘留一些殘留物。因此,如果后續(xù)的實(shí)驗結(jié)果受到醛基的影響,則有必要盡可能地沖洗掉殘留的聚甲醛。
5.醛基可以通過與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,這可能部分或完-全掩蓋某些抗原表位,防止其完-全暴露。這可能導(dǎo)致假陰性染色并影響免疫組織化學(xué)結(jié)果。因此,當(dāng)使用用4%聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣本進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測時,有時需要在進(jìn)行免疫染色或其他后續(xù)程序之前提取抗原。
6.本產(chǎn)品對人體有害。請小心處理,并采取適當(dāng)?shù)谋Wo(hù)措施,避免直接接觸身體或吸入。
7.本產(chǎn)品僅供專業(yè)人員用于科學(xué)研究目的,不得用于臨床診斷或治療、食品或藥物用途,也不得存放在普通居民區(qū)。
8.為了您的安全和健康,在處理本產(chǎn)品時,請穿戴實(shí)驗室服裝和一次性口罩。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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