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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>Biogradetech Bouin's固定液的制備和使用注意事項(xiàng)
固定的目的是保留細(xì)胞和組織的原始形態(tài)結(jié)構(gòu)。固定劑可以防止內(nèi)源性溶酶體酶自溶,抑制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)。固定劑通過(guò)凝結(jié)、形成添加劑化合物和滅活酶來(lái)誘導(dǎo)蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化。固定液主要分為醛固定液、汞固定液、醇固定液、氧化劑固定液和苦-味-酸固定液。常用的是來(lái)自醛基的福爾馬林和來(lái)自醇基的乙醇。Bouin’S Fixative(Bouin’S fluid/Solution)主要由PA組成,甲醛和乙酸。PA可引起蛋白質(zhì)沉淀和組織收縮而沒(méi)有組織硬化。當(dāng)PA與甲醛和乙酸混合時(shí),滲透速度增加,導(dǎo)致固定均勻。組織表現(xiàn)出輕微的收縮,精細(xì)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰地顯示出來(lái),使其成為一種極-好的固定劑。Bouin’S Fixative對(duì)Masson三色染色等染色技術(shù)具有中介作用,可增強(qiáng)結(jié)締組織和肌肉纖維的染色。用Bouin‘S Fixative固定的組織呈現(xiàn)出鮮艷的顏色。這種固定劑還可以軟化皮膚和肌腱,促進(jìn)切片過(guò)程。
艾美捷Bouin's固定液基本參數(shù):
目錄號(hào):A-CSH480
規(guī)格:100mL, 500mL, 1000mL
儲(chǔ)存:室溫(24個(gè)月)
Bouin's固定液程序:
1.通常,固定通常只需要30-60分鐘。如果組織塊較大,可以適當(dāng)延長(zhǎng)固定時(shí)間,但不應(yīng)超過(guò)24小時(shí)。
2.用Bouin’S Fixative固定后,可以用自來(lái)水短暫沖洗組織,也可以直接轉(zhuǎn)移到70%乙醇中脫水。在乙醇脫水過(guò)程中,大部分苦-味-酸(PA)可以被去除,使組織呈現(xiàn)輕微的黃色,這不影響染色。
注:
1.Bouin’S Fixive對(duì)人體有一定的危害。請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)良好的環(huán)境中小心處理,避免吸入。
2.組織樣品的厚度不同,因此固定時(shí)間不同。正確選擇組織樣本有利于固定劑的滲透。常規(guī)活檢樣本的推薦厚度為2-4mm,通常不超過(guò)6mm。
3.需要足夠體積的固定劑。固定劑和組織塊之間的體積比應(yīng)該更大如果體積不夠大,在固定過(guò)程中可以更換1-3次固定劑。
4.溫度對(duì)固定有顯著影響。提高溫度可以加速固定過(guò)程,但溫度不應(yīng)過(guò)高。
5.取出新鮮組織后,應(yīng)及時(shí)固定。如果不能立即固定,應(yīng)將組織放入生理鹽水中,并盡快送去檢查。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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