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由于環(huán)境因素和細胞內(nèi)正常代謝過程,DNA損傷每天在細胞中以每個細胞每天1,000到1,000,000個分子損傷的速率發(fā)生。雖然這只占人類基因組的約60億個堿基(30億個堿基對)的一小部分,但對關鍵基因的未修復損傷會阻礙細胞的功能,并顯著增加患癌的可能性。彗星試驗,或稱單細胞凝膠電泳試驗(SCGE),是測量單個細胞中DNA損傷的常用技術。在電泳場的作用下,受損的細胞DNA(含有碎片和鏈斷裂)與完整的DNA分離,顯微鏡下呈現(xiàn)出經(jīng)典的“彗尾"形狀。通常通過彗尾測量來直觀估計DNA損傷的程度;然而,也有圖像分析軟件可用于測量各種參數(shù)。OxiSelect™彗星試劑盒是一種快速而敏感的用于測量細胞DNA損傷的試劑盒。每個試劑盒提供足夠的試劑進行多達15次試驗。
艾美捷OxiSelect彗星分析試劑盒(3孔載玻片)檢測原理:
Cell Biolabs的OxiSelect™彗星試劑盒是一種用于簡單評估細胞DNA損傷的單細胞凝膠電泳試驗(SCGE)。
首先,將單個細胞與熔化的瓊脂糖混合,然后涂抹在OxiSelect™彗星載玻片上。
然后,這些嵌入的細胞經(jīng)過裂解緩沖液和堿性溶液處理,使DNA得到松弛和變性。
最后,樣品在水平電泳槽中進行電泳,將完整的DNA與受損的碎片分離。電泳結束后,樣品被干燥、染色以及通過熒光顯微鏡進行觀察。在這些條件下,受損的DNA(含有切割和鏈斷裂)將遷移比完整的DNA更遠,并產(chǎn)生“彗尾"形狀(見圖1)。每個試劑盒提供足夠的試劑進行多達15次試驗。
彗星測定原理
彗星分析試劑盒相關研究:
1. STA-320: OxiSelect™ Oxidative DNA Damage ELISA Kit (8-OHdG Quantitation)
2. STA-321: OxiSelect™ DNA Double-Strand Break (DSB) Staining Kit
3. STA-324: OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP sites)
4. STA-325: OxiSelect™ Oxidative RNA Damage ELISA Kit (8-OHG Quantitation)
5. STA-351: OxiSelect™ Comet Assay Kit (3-Well Slides)
6. STA-352: OxiSelect™ Comet Assay Slides (3-Well)
7. STA-353: OxiSelect™ Comet Assay Slides (3-Well)
8. STA-355: OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Kit
9. STA-356: OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Slide
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