凝血酶是由大小分別為31KD和6KD的兩條肽鏈通過二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶,可從動物血漿中利用已激活凝血酶原水解制得,可催化纖維蛋白原(flbrinogen)水解釋放A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進一步聚合,在血小板、紅細胞和白細胞等參與下形成血凝塊,常用于診斷學中凝血化驗、凝血因子檢測、血液或血漿的脫纖維化等;另外,由于凝血酶切割序列專一,水解效率高,因此在分子生物學、生物化學或生物工程制藥研究中也常作為工具酶用于重組融合蛋白(包含凝血酶識別位點)的特異性斷裂。
牛凝血酶(>2000IU/mg)凝血酶(Thrombin)來源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成的。
艾美捷牛凝血酶(>2000IU/mg):
目錄號:A-CSH002
尺寸:1000U
儲存:2-8°C(36個月)
分子量:37 kDa
外觀:白色凍干粉或固體塊
比活度:≥2000 |U/mg
純度:SDS-PAGE分析中未觀察到雜質帶
pH(25℃):5.0~6.0
牛凝血酶(>2000IU/mg)用法:
這種凝血酶是一種廣泛應用的蛋白酶,可用于切割標簽,并且可以高效地切割質量比低至1:2000的蛋白質。在20°C至37°C的溫度范圍內,切割時間為0.3至16小時。凝血酶的最佳切割位點是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',其中X4和X3是疏水性氨基酸,X1'和X2'是非酸性氨基酸。一些常用的識別位點包括L-V-P-R-G-S、L-V-P-R-G-F和M-Y-P-R-G-N。X4-X3-P-R-G-X2'之間的切割比X4-X3-P-K-L-X2'更有效。另一個識別位點是X2-R[K]-X1',其中X2或X1'是甘氨酸,比如A-R-G和G-K-A,切割發(fā)生在第二個殘基之后。在凝血酶切割位點和N-末端標簽之間插入五個甘氨酸殘基可以改善切割效果。這種"甘氨酸連接肽"可使完-全切割所需的酶量減少,并且還可以防止?jié)撛诘腻e誤切割。有效的消化緩沖液是含有20 mM Tris-HCl緩沖液和150 mM氯化鈉的pH 8.0的溶液??梢允褂脤Π被郊柞啺酚H和純化、苯甲酰亞胺親和純化或肝素親和純化去除切割產物中的凝血酶。
該試劑僅用于科學研究領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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