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標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測是一種強大的工具,用于評估細胞裂解液中目標蛋白質(zhì)的多聚泛素化水平。該平臺基于捕獲板上的多聚泛素化蛋白質(zhì),然后使用抗體檢測感興趣的蛋白質(zhì)(天然的或標記的),以量化蛋白質(zhì)的多聚泛素化形式。檢測特定蛋白質(zhì)響應外部刺激的泛素化狀態(tài)的變化是一個漫長而困難的過程,涉及免疫沉淀和隨后的蛋白質(zhì)印跡分析。標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測是 IP/WB 分析的快速、穩(wěn)定且定量的替代方案。
注意:該試劑盒已經(jīng)過優(yōu)化和驗證,可用于評估標記蛋白的多聚泛素化水平。因此,最終用戶必須指-定表位標簽,以便接收適當?shù)目贵w進行檢測(myc、HA、FLAG® 、 V5、GST。不幸的是,His 6不能用于此測定)。
蛋白質(zhì)泛素化是一種廣泛存在于細胞中的翻譯后修飾過程,通過共價結合泛素蛋白連接酶(E3)和泛素激活酶(E1)和泛素結合酶(E2)的協(xié)同作用,將泛素蛋白連接到特定的靶蛋白上。這一修飾過程在細胞內(nèi)發(fā)揮著重要的調(diào)控作用,包括蛋白質(zhì)降解、細胞信號傳導、細胞周期調(diào)控以及DNA修復等。
為了研究蛋白質(zhì)泛素化在細胞調(diào)控中的作用,科學家們開發(fā)了多種方法來檢測和定量蛋白質(zhì)的泛素化水平。其中,標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測成為了研究人員廣泛應用的一種技術。該技術利用特定的抗體或結構域識別泛素化的靶蛋白,并通過免疫印跡、免疫組化或質(zhì)譜等方法來檢測和定量泛素化水平。
標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測的優(yōu)勢在于其高靈敏度和特異性。通過選擇適當?shù)目贵w或結構域,可以針對特定的泛素化位點或鏈類型進行檢測。此外,該技術還可以通過Western blot等方法進行半定量或定量分析,從而提供關于泛素化水平的定量信息。
在研究中,標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測已經(jīng)被廣泛應用于多個領域。例如,在癌癥研究中,該技術被用于研究腫瘤相關蛋白的泛素化水平變化,以及泛素化在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用。此外,該技術還在神經(jīng)退行性疾病、免疫調(diào)節(jié)和細胞應激等領域中發(fā)揮了重要作用。
艾美捷標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測(LSS-UE103)的應用領域:
確定細胞處理導致的底物多聚泛素化水平的變化。
使用特異性結合目標蛋白質(zhì)的抗體。
高通量、定量方法
標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測相關研究:
PA950:PROTAC® 檢測板
PA770:PROTAC® 體外泛素化檢測試劑盒
UE101:UbiQuant™ 套件
總之,標簽蛋白質(zhì)多泛素化水平檢測是一種有效的方法,可以揭示細胞調(diào)控中蛋白質(zhì)泛素化的重要機制。
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