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PARP1 的 PARPtrap™ 檢測試劑盒設(shè)計用于在使用熒光偏振 (FP) 的高通量篩選檢測中測量 PARP1/DNA 復(fù)合物的形成。已知 PARP1 通過其 DNA 結(jié)合域結(jié)合受損的 DNA。與 DNA 結(jié)合激活 PARP1,并且在 NAD+ PARP1 核糖基化自身(自核糖基化)存在下,由于核糖基聚合物的累積負(fù)電荷,導(dǎo)致 PARP1 從 DNA 中解離。然而,在存在一些抑制劑的情況下,PARP仍然與DNA結(jié)合,這種現(xiàn)象稱為捕獲。捕獲的PARP-DNA復(fù)合物已被證明對癌細(xì)胞具有高度細(xì)胞毒性,因此這種抑制劑可能是癌癥治療的理想選擇。
PARP1 PARPtrap™ 檢測試劑盒的關(guān)鍵是熒光標(biāo)記的寡核苷酸雙鏈體。在沒有核糖基化的情況下,PARP1與熒光探針結(jié)合,形成一個大的復(fù)合物,并導(dǎo)致發(fā)射高偏振光。然而,在自核糖基化后,PARP1 與寡核苷酸雙鏈體解離,然后寡核苷酸雙鏈體自由旋轉(zhuǎn),發(fā)出較少的偏振光(圖 1)。添加 PARP1 抑制劑導(dǎo)致 PARP1 捕獲到熒光寡核苷酸雙鏈體中,并以劑量依賴性方式增加 FP 信號。
用于 PARP1 的 PARPtrap™ 檢測試劑盒是一種熒光偏振均相檢測試劑盒。使用能夠測量熒光偏振的熒光酶標(biāo)儀測量FP信號。
艾美捷PARP1的PARPtrap檢測試劑盒:
英文名稱:PARPtrap Assay Kit for PARP1
貨號:BPS-80584
同義詞:聚(ADP-核糖)聚合酶1,聚(ADP-核糖基)轉(zhuǎn)移酶,ADPRT,PARP1,80584-1,80584-2
檢測試劑盒形式:熒光偏振
提供方式:用于 PARP1 的 PARPtrap 檢測試劑盒采用方便的 96 孔或 384 孔形式,包含純化的 PARP1 酶、熒光標(biāo)記的寡核苷酸雙鏈體和用于 100 或 400 種酶反應(yīng)的 PARPtrap™™ 檢測緩沖液。
儲存/穩(wěn)定性:當(dāng)材料按照指示儲存時,該檢測試劑盒將在收到之日起長達(dá) 6 個月內(nèi)發(fā)揮最佳性能。
使用說明:有關(guān)詳細(xì)實驗方案,請參閱檢測試劑盒數(shù)據(jù)表。
應(yīng)用:非常適合在藥物發(fā)現(xiàn)和高溫超導(dǎo)應(yīng)用中篩選增強(qiáng) PARP1/DNA 捕獲的小分子,以及測定化合物 IC50。
運(yùn)輸溫度:-80°攝氏度
僅供研究使用
產(chǎn)品數(shù)據(jù):
PARP1的PARPtrap檢測試劑盒文獻(xiàn)參考:
1. Murai, J., et al. Molecular Cancer Therapeutics 2014. 13:433-443.
2. Murai, J., et. al. Cancer Research 2012. 72:5588-5599.
3. Zandarashvili, L., et al. Science 2020. 368(6486): eaax6367.
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