AAT Bioquest致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

艾美捷AAT Bioquest生物偶聯(lián)相關(guān)研究：

生物素和鏈霉親和素

染料到蛋白質(zhì)偶聯(lián)

iFluor® 染料和試劑盒

mFluor™ 染料和試劑盒

蛋白質(zhì)間偶聯(lián)

1、生物素-鏈霉親和素偶聯(lián)系統(tǒng)：

生物素-鏈霉親和素偶聯(lián)系統(tǒng)的廣泛采用主要?dú)w因于兩個(gè)因素。首先是生物素和鏈霉親和素分子本身的尺寸相對(duì)較小，這允許與生物活性大分子（如抗體）廣泛結(jié)合，而不會(huì)阻抗其功能（即抗體的結(jié)合位點(diǎn)）。其次是生物素和鏈霉親和素相互結(jié)合的特異性以及隨后結(jié)合的強(qiáng)度，這使得強(qiáng)大的、流線型的生物測(cè)定應(yīng)用成為可能。鏈霉親和素四聚體對(duì)生物素具有非常高的結(jié)合親和力，解離常數(shù) （Kd） 約為 ~10-14mol/L。這種緊密而特異性的結(jié)合速度很快，可以承受ji端的pH值、溫度、有機(jī)溶劑和變性試劑。

優(yōu)勢(shì)

生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的一個(gè)關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)是它能夠提高檢測(cè)靈敏度。這在很大程度上是由于鏈霉親和素的四聚體構(gòu)象。一種鏈霉親和素蛋白可以結(jié)合四個(gè)生物素分子，具有高親和力和選擇性。這種多重性能夠放大微弱信號(hào)，并通過簡(jiǎn)單的工作流程提高哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中中等和低豐度靶標(biāo)的檢測(cè)靈敏度。

另一個(gè)關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)是生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的多功能性。由于鏈霉親和素可以與各種報(bào)告基因標(biāo)簽偶聯(lián)，因此它可以很容易地?fù)饺霂缀跛忻庖邷y(cè)定中。例如，鏈霉親和素的酶偶聯(lián)物廣泛用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 （ELISA），而熒光標(biāo)記的鏈霉親和素（如 iFluor® 488 鏈霉親和素）則廣泛用于細(xì)胞表面標(biāo)記、熒光激活細(xì)胞分選 （FACS） 和其他熒光成像應(yīng)用。

應(yīng)用

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

免疫組化 （IHC）

功率苯胺信號(hào)放大，酪胺™的優(yōu)質(zhì)替代品

免疫印跡

免疫熒光顯微鏡

細(xì)胞表面標(biāo)記

親和純化

熒光激活細(xì)胞分選 （FACS）

流式細(xì)胞術(shù)

2、生物素：

生物素是一種 244 道爾頓半抗原小分子。其對(duì)鏈霉親和素的高結(jié)合親和力通常用于檢測(cè)和監(jiān)測(cè)感興趣的生物靶標(biāo)。生物素具有兩個(gè)特性，使其成為生物偶聯(lián)物開發(fā)的理想選擇。首先，生物素的體積相對(duì)較小。這允許將多個(gè)生物素標(biāo)簽標(biāo)記到單個(gè)蛋白質(zhì)或抗體上，而不會(huì)顯著阻礙其生物反應(yīng)性。第二個(gè)是生物素分子的戊酸側(cè)鏈。該鏈可以衍生化，以促進(jìn)用于將生物素與蛋白質(zhì)偶聯(lián)的各種反應(yīng)性基團(tuán)摻入，而不會(huì)改變生物素對(duì)鏈霉親和素的結(jié)合親和力。

AAT Bioquest 提供生物素化的二抗、蛋白質(zhì)、核苷酸和其他小分子，用于基于鏈霉親和素的擴(kuò)增技術(shù)。對(duì)于無法獲得生物素化探針的檢測(cè)，我們提供了許多生物素化試劑和試劑盒，使研究人員能夠?qū)Φ鞍踪|(zhì)、核酸和表面材料進(jìn)行化學(xué)標(biāo)記，以制造定制的生物素化試劑。

特色產(chǎn)品

熒光生物素衍生物

生物素化次級(jí)

生物素化核苷酸

生物素化氨基酸

反應(yīng)性生物素衍生物

ReadiLink™ 蛋白生物素化試劑盒

Amplite® 比色生物素定量試劑盒

3、熒光生物素衍生物

熒光生物素衍生物在同一分子中含有熒光團(tuán)和生物素部分。這些試劑用于通過熒光檢測(cè)和定量生物素結(jié)合蛋白。與鏈霉親和素與熒光生物素結(jié)合相關(guān)的強(qiáng)猝滅可用于精確測(cè)量鏈霉親和素（或親和素）的濃度。

4、生物素化二抗

AAT Bioquest生物素化的二抗，用于基于鏈霉親和素的擴(kuò)增技術(shù)。使用生物素化二抗的一個(gè)關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)是，通過使用不同的鏈霉親和素偶聯(lián)物，可以靈活地在多種應(yīng)用中使用相同的二抗。

現(xiàn)成的鏈霉親和素偶聯(lián)物

HRP-鏈霉親和素（成像需要 HRP 底物)

AP-鏈霉親和素（成像需要 AP 底物)

iFluor®-鏈霉親和素

mFluor™-鏈霉親和素

APC、PE和串聯(lián)染料鏈霉親和素（藻膽蛋白的強(qiáng)烈明亮熒光和快速光漂白非常適合流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用）

5、生物素化核苷酸

生物素修飾的三磷酸核苷類似物，如 dUTP 和 dCTP，可以酶促摻入 DNA 或 RNA 片段中，用于熒光原位雜交 （FISH）、DNA 陣列、微陣列和其他雜交技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的酶促非放射性 DNA 標(biāo)記反應(yīng)包括 3 端標(biāo)記、cDNA 標(biāo)記、缺口翻譯、PCR 和隨機(jī)引物標(biāo)記。每個(gè)生物素化核苷酸在生物素與其在核苷酸上的附著點(diǎn)之間含有一個(gè) 11、14、16 或 20 原子間隔區(qū)。這有助于通過熒光團(tuán)和鏈霉親和素偶聯(lián)物或瓊脂糖和磁珠進(jìn)行檢測(cè)和信號(hào)放大。

6、生物素化氨基酸

生物素化肽適用于免疫檢測(cè)研究和生物醫(yī)學(xué)篩選測(cè)定，這些研究需要固定在鏈霉親和素或親和素包被的微量滴定板、微球或膜上。在Fmoc固相合成過程中，生物素可以與肽的N端或賴氨酸（Lys）、谷氨酸（Glu）或天冬氨酸（Asp）的側(cè)鏈連接。在 FMOC-Glu（生物素基-PEG）-OH 和 FMOC-Asp（生物素-PEG）-OH 中摻入 PEG 間隔區(qū)可減少靶肽和鏈霉親和素之間的空間位阻，從而更好地結(jié)合生物素。PEG間隔區(qū)的親水性可最大限度地減少非特異性相互作用，并提高試劑和生物素化肽的溶解度。

7、反應(yīng)性生物素衍生物

反應(yīng)性生物素衍生物含有反應(yīng)性部分，如琥珀酰亞胺酯或馬來酰亞胺，有助于將生物素標(biāo)記到蛋白質(zhì)、抗體和其他大分子上。選擇反應(yīng)性生物素衍生物時(shí)，請(qǐng)考慮以下幾點(diǎn)：

功能基團(tuán)靶向 - 特定的反應(yīng)性部分靶向并結(jié)合其各自的官能團(tuán)，以實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)和其他大分子的靶向或非選擇性生物素化（例如，琥珀酰亞胺酯靶向伯胺，馬來酰亞胺靶向硫醇或巰基）。

溶解度 - 這會(huì)影響目標(biāo)蛋白或大分子的生物素化。

間隔臂長(zhǎng)度 （PEG） - 提高靶蛋白的檢測(cè)靈敏度并減少空間位阻。

ReadiView™ 生物素化試劑

確定蛋白質(zhì)的生物素化程度是相當(dāng)具有挑戰(zhàn)性的，因?yàn)樯锼氐膬?nèi)在吸收很難從蛋白質(zhì)和核酸中辨別出來。為了促進(jìn)這種測(cè)定，我們提供了一系列發(fā)色團(tuán)反應(yīng)性生物素衍生物ReadiView™生物素。

這些新型生物素化試劑包含一個(gè)專門設(shè)計(jì)的“色標(biāo) （CT）"，該標(biāo)簽最佳位置位于兩個(gè)間隔臂之間。這些間隔臂可減少空間位阻并提高水溶性，而 CT 標(biāo)簽可通過計(jì)算 280 nm/385 nm 的吸收比輕松量化生物素化程度。CT標(biāo)簽不影響生物素與鏈霉親和素的絡(luò)合，并且對(duì)熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物的淬滅作用最小。ReadiView™ 生物素有胺反應(yīng)性、巰基反應(yīng)性和點(diǎn)擊化學(xué)形式。

8、酶標(biāo)記的鏈霉親和素偶聯(lián)物

酶標(biāo)記的鏈霉親和素偶聯(lián)物通常用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 （ELISA）、免疫組化、免疫印跡和原位雜交技術(shù)。辣根過氧化物酶 （HRP） 和堿性磷酸酶 （ALP） 因其高周轉(zhuǎn)率、穩(wěn)定性、易于偶聯(lián)和低成本而被廣泛用作報(bào)告基因標(biāo)簽。

為了最大限度地保留酶和蛋白質(zhì)活性，我們的 HRP-鏈霉親和素和 AP-鏈霉親和素偶聯(lián)物以 1：1（酶與鏈霉親和素）標(biāo)記比制備。顯色、熒光和化學(xué)發(fā)光底物可用于這些酶偶聯(lián)物。

9、熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物

熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物廣泛用于熒光成像，以檢測(cè)生物素化抗體、配體和 DNA 探針，用于原位雜交技術(shù)、免疫組化和多色流式細(xì)胞術(shù)。我們提供用 iFluor 染料、mFluor®™ 染料、藻膽蛋白、串聯(lián)染料等標(biāo)記的熒光鏈霉親和素的綜合產(chǎn)品組合。我們的 iFluor® 鏈霉親和素偶聯(lián)物的優(yōu)點(diǎn)包括異常明亮的熒光、出色的光穩(wěn)定性和在較寬摩爾范圍內(nèi)對(duì) pH 值不敏感的熒光。

iFluor® 鏈霉親和素偶聯(lián)物

用 iFluor 染料標(biāo)記的鏈霉親和素偶聯(lián)物表現(xiàn)出異常明亮且光穩(wěn)定的熒光，優(yōu)于 Alexa Fluor®® 和其他光譜相似的偶聯(lián)物。iFluor® 鏈霉親和素偶聯(lián)物設(shè)計(jì)用于各種細(xì)胞分析和蛋白質(zhì)分析應(yīng)用，包括成像、流式細(xì)胞術(shù)和熒光免疫印跡。作為預(yù)防措施，在檢測(cè)低豐度靶標(biāo)時(shí)避免使用藍(lán)色熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物。與其他染料相比，藍(lán)色熒光染料具有較低的熒光，并且可以經(jīng)歷更高的非特異性背景。

10、用于流式細(xì)胞術(shù)的mFluor™鏈霉親和素偶聯(lián)物

用 mFluor™ 染料標(biāo)記的鏈霉親和素偶聯(lián)物表現(xiàn)出最小的自淬滅，可產(chǎn)生用于流式細(xì)胞術(shù)的強(qiáng)烈熒光和光穩(wěn)定偶聯(lián)物。mFluor™ 鏈霉親和素偶聯(lián)物設(shè)計(jì)用于流式細(xì)胞儀中常用的主要激光譜線之一（如 405 nm、488 nm、532 nm、561 nm 或 633 nm 激光譜線）的最佳激發(fā)。

11、用于流式細(xì)胞術(shù)的鏈霉親和素 APC、PE、PerCP 和串聯(lián)染料偶聯(lián)物

鏈霉親和素 PE、APC 和 PerCP 偶聯(lián)物通常用于需要高靈敏度但不具有光穩(wěn)定性的應(yīng)用，主要是流式細(xì)胞術(shù)、流式細(xì)胞儀、免疫表型分析和微陣列。藻膽蛋白異常明亮的熒光是由于其異常高的消光系數(shù)和量子產(chǎn)率。

串聯(lián)染料偶聯(lián)了標(biāo)記的供體藻膽蛋白（例如 APC 或 PE）與受體 iFluor 染料的妥協(xié)，這些受體 iFluor® 染料以更長(zhǎng)的波長(zhǎng)發(fā)出熒光。使用熒光共振能量轉(zhuǎn)移 （FRET），供體藻膽蛋白吸收的光導(dǎo)致受體的熒光發(fā)射。在流式細(xì)胞術(shù)中，串聯(lián)染料非常適合細(xì)胞的多色參數(shù)分析，因?yàn)樗鼈兝昧藛我患ぐl(fā)源和顯著較大的斯托克斯位移。

12、鏈霉親和素-Xtra™ 偶聯(lián)物

鏈霉親和素-Xtra™ iFluor® 偶聯(lián)物的最佳標(biāo)記程度可產(chǎn)生最明亮的熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物，用于在細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)和蛋白質(zhì)印跡應(yīng)用中檢測(cè)生物素化抗體。鏈霉親和素-Xtra™ iFluor 偶聯(lián)物對(duì)低豐度靶標(biāo)成像，比傳統(tǒng)鏈霉親和素 Alexa Fluor®® 偶聯(lián)物具有更高的靈敏度和細(xì)節(jié)。

優(yōu)勢(shì)

明亮且光穩(wěn)定的熒光，無明顯的自猝滅

高信噪比：信號(hào)比 Alexa Fluor® 提高 3~5 倍

在較寬的摩爾范圍內(nèi)對(duì) pH 值不敏感的熒光

艾美捷科技是AAT Bioquest的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。