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三維凝膠可以用于研究細(xì)胞發(fā)育、遷移和形態(tài)的機(jī)械性質(zhì)對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的影響,如密度和剛度。與二維系統(tǒng)不同,三維環(huán)境使細(xì)胞伸展能夠同時(shí)與細(xì)胞表面的整合素相互作用,從而激活特定的信號(hào)通路。凝膠的剛度或剛性在三維環(huán)境與二維環(huán)境中對(duì)細(xì)胞遷移產(chǎn)生不同的影響。此外,在三維系統(tǒng)中,還可能出現(xiàn)與整合素?zé)o關(guān)的機(jī)械相互作用,這是由于基質(zhì)纖維與細(xì)胞伸展物相互交織,而在二維系統(tǒng)中,細(xì)胞附著在平坦表面上,無(wú)法發(fā)生這種情況。
Advanced BioMatrix/艾美捷PhotoCol 甲基丙烯酸膠原蛋白,100 毫克,含LAP套件(ABM-5270-1KIT),一種純化的甲基丙烯?;?span style="font-family: Calibri;">I型牛膠原套裝,可在不同濃度下制備,并通過(guò)藍(lán)光交聯(lián),提供類似天然的可調(diào)節(jié)的三維膠原凝膠。PhotoCol®套裝由純化的甲基丙烯?;?span style="font-family: Calibri;">I型牛膠原作為核心成分,配合套裝中的其他支持試劑。
甲基丙烯?;?span style="font-family: Calibri;">I型膠原蛋白是由保留端肽完整的牛膠原產(chǎn)生的,其中膠原蛋白經(jīng)過(guò)改性反應(yīng),主要是對(duì)賴氨酸殘基的ε-氨基基團(tuán)以及N-末端的α-氨基基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)修飾。膠原蛋白分子中超過(guò)20%的賴氨酸殘基已經(jīng)進(jìn)行了甲基丙烯酰化。
膠原蛋白是從牛皮中提取的,含有高含量的單體。膠原蛋白的起始原料是從一個(gè)封閉的養(yǎng)殖群體中分離出來(lái)的,并通過(guò)受控制的制造過(guò)程進(jìn)行純化。20毫摩爾乙酸溶液用于在濃度范圍為3至8毫克/毫升的情況下使凍干的甲基丙烯?;z原蛋白溶解。中和溶液由堿性的10倍磷酸鹽緩沖鹽溶液(PBS)組成,在最終混合物中提供生理鹽和中性pH值。光引發(fā)劑溶液由LAP組成,可以在1倍PBS或細(xì)胞培養(yǎng)基中配制,以便在405納米處對(duì)膠原蛋白進(jìn)行藍(lán)光光交聯(lián)。為了進(jìn)行滅菌處理,需要重新懸浮并通過(guò)0.2微米的按鈕過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾。
Advanced BioMatrix PhotoCol 甲基丙烯酸膠原蛋白,100 毫克,含LAP套件存儲(chǔ)說(shuō)明:
存儲(chǔ)/穩(wěn)定性:產(chǎn)品在冷凍凝膠包裝上發(fā)貨。收到后,將膠原蛋白、乙酸和光引發(fā)劑存放在2至10攝氏度的溫度下,不要冷凍。將中和溶液存放在室溫下。產(chǎn)品標(biāo)簽和適用的分析證書(shū)上印有有效期限。有效期適用于按照指示進(jìn)行處理和儲(chǔ)存的產(chǎn)品。在使用乙酸溶解膠原蛋白后,當(dāng)在2至10攝氏度下儲(chǔ)存時(shí),膠原溶液可以穩(wěn)定保存2個(gè)月。
凝膠硬度:PhotoCol®試劑盒旨在提供基于膠原蛋白濃度和交聯(lián)的不同硬度的膠凝膠。光強(qiáng)度、蛋白質(zhì)濃度、光引發(fā)劑濃度、光交聯(lián)時(shí)間和其他變量將影響聚合性能。
制備說(shuō)明:
注意:在制備和處理膠原蛋白和其他溶液的過(guò)程中,采用無(wú)菌操作以保持產(chǎn)品的無(wú)菌性。
注意:建議在制備膠原蛋白時(shí)將膠原蛋白和其他工作溶液冷藏并放在冰上。
注意:不建議在任何步驟中使用渦旋混合。
注意事項(xiàng)和免責(zé)聲明:
本產(chǎn)品僅供研發(fā)使用,不用于人類或其他用途。有關(guān)危險(xiǎn)和安全操作規(guī)程的信息,請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表。
文獻(xiàn)參考:
1. Gaudet, I. D., Characterization of MethacryatedType-I Collagen as a Dynamic PhotoactiveHydrogel, Biointerphases, 2012 Dec; 7(1): 25.
2. Drzewiecki K. E., Methacrylation Induces Rapid,Temperature-Dependent, Reversible Self-Assemblyof Type-I Collagen, Langmuir. 2014 Sep 23; 30(37):11204–11211.
Advanced BioMatrix是3D組織培養(yǎng)、細(xì)胞檢測(cè)和細(xì)胞增殖等領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)解決方案的佼-佼-者,在分離、純化、凍干、細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白檢測(cè)、多肽粘附、附著因子、基質(zhì)硬度和其他3D matrix 產(chǎn)品開(kāi)發(fā)方面有著豐富的經(jīng)驗(yàn)。競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì):
提供高純度和成分確定的胞外基質(zhì);
超過(guò)1000余篇文獻(xiàn)引用PureCol 膠原產(chǎn)品,品質(zhì)非常均一;
在3D培養(yǎng)基領(lǐng)域可提供全面的產(chǎn)品線;
可提供特異性剛性有機(jī)硅基板的公司(CytoSoft);
可提供可溶性絲纖蛋白的供應(yīng)商(可運(yùn)用于多種3D培養(yǎng));
如果客戶首-次接觸3D膠原凝膠,Advanced BioMatrix是預(yù)制膠原蛋白(PureCol EZ gel)供應(yīng)商。
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