彈性蛋白前體物Tropoelastin是彈性蛋白分子的前體。Tropoelastin通常不以其原生狀態(tài)存在，因為它在細胞合成后立即發(fā)生交聯(lián)，并在被導出到細胞外基質期間發(fā)生交聯(lián)。彈性蛋白存在于身體的許多組織中，包括皮膚、動脈壁和韌帶。彈性蛋白聚集體負責皮膚、動脈壁和韌帶的伸展特性，彈性蛋白與幾種遺傳疾病有關，包括松弛皮膚癥（皮膚彈性喪失）和彈性皮膚癥（類似于松弛皮膚癥，但皮膚真皮層中有葡萄狀彈性蛋白聚積）。彈性蛋白賦予組織和器官強度和彈性。這種蛋白質的異常和高度特征性的氨基酸組成使其具有很強的疏水性。它含有三分之一的甘氨酸氨基酸和幾種賴氨酸衍生物，這些賴氨酸衍生物用作蛋白單體之間的共價交聯(lián)。因此，彈性蛋白是一個三維網(wǎng)絡，兩個交聯(lián)點之間有60-70個氨基酸。這種分子結構對其彈性特性、不溶性和抗蛋白水解作用起決定作用。Advanced BioMatrix的人源Tropoelastin是通過重組加工方法獲得的。該產品以無菌、凍干粉末的形式提供，每支含1毫克。

艾美捷人重組原彈性蛋白，1 mg #ABM-5052-1MG特性鑒定/純度：

使用電泳（SDS-PAGE）定性評估彈性蛋白的身份和純度。

數(shù)量：彈性蛋白以1毫克裝在凍干粉末瓶中供應。

無菌性：無生長 - 最終產品通過低劑量電子束輻射終端滅菌。

內毒素：<10 EU/ml存儲：該產品在溶解前存儲在-20°C，并在冷凍膠冰包裝中發(fā)貨。建議在重新溶解后將產品存儲在2-10°C。

穩(wěn)定性：產品在-20°C存儲時的貨架壽命為24個月。在重新溶解后，產品在2-10°C存儲時的貨架壽命為3個月。

人重組原彈性蛋白細胞粘附實驗：

為展示生物活性，將人體真皮成纖維細胞播種在涂有彈性蛋白的表面上，在無血清條件下。所有表面都用含有1%牛血清白蛋白（BSA）的溶液阻斷。細胞然后被允許在37°C下附著一個小時。結果顯示彈性蛋白具有顯著的細胞附著生物活性。對照表面只顯示出極少的細胞附著。

注意事項和免責聲明：本產品僅供研發(fā)使用，不適用于人類或其他用途。請查閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取有關危害和安全操作規(guī)范的信息。

人重組原彈性蛋白制備步驟：

1. 向含1毫克彈性蛋白的血清瓶中加入1毫升無菌0.25%冰醋酸溶液。

2. 輕輕混合至物質完-全溶解。溶液可能仍然略顯混濁。

3. 如有需要，將所需量的溶液從血清瓶轉移到稀釋容器。使用無菌0.25%冰醋酸溶液進一步稀釋至所需濃度。典型的工作濃度范圍可從1到50 μg/ml不等。注意：將這些建議作為指導，確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適涂層條件。

4. 向培養(yǎng)表面加入適量稀釋后的彈性蛋白物質。

5. 在室溫或37°C下覆蓋孵育1-2小時。

6. 孵育后，吸去任何剩余物質。

7. 用無菌dH2O小心沖洗涂層表面，避免劃傷表面。

8. 涂層表面已經(jīng)可以使用。如果保持無菌性，也可以在2-10°C濕潤或風干保存。注意：為保持無菌性，在層流罩中采用無菌技術進行所有操作。

人重組原彈性蛋白文獻參考：

J. Holst, S. Watson, M. Lord, S. Eamegdool, D. Bax, L. Nivison-Smith, A.Kondyurin, L. Ma, A. Oberhauser, A. Weiss & J. Rasko, “Substrate elasticityprovides mechanical signals for the expansion of hemopoietic stem andprogenitor cells", Nature Biotechnology Volume 28, Number 10, October2010, Pages 1123-1130.

Beth A. Kozel , Hiroshi Wachi§, Elaine C. Davis?, and Robert P. Mecham,Domains in Tropoelastin That Mediate Elastin Deposition in Vitro and in Vivo,J. Biol. Chem., Vol. 278, Issue 20, 18491-18498, May 16, 2003

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