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腔腸400a/Coelenterazine 400a是一種適用于Renilla熒光素酶(Rluc)的底物,但不適用于Gaussia熒光素酶。它被用于實(shí)時(shí)檢測(cè)鈣離子、基因報(bào)告實(shí)驗(yàn),并且是生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)實(shí)驗(yàn)中優(yōu)選的底物。這種衍生物的發(fā)射zui大值在400納米左右,因此對(duì)GFP受體的發(fā)射干擾極小。
我們推薦使用CAT#399納米燃料溶劑來溶解和穩(wěn)定天然Coelenterazine。
艾美捷腔腸400a/Coelenterazine 400a(#340)參數(shù):
化合物編號(hào) Coelenterazine 400a,1-去氧Coelenterazine,二去氫Coelenterazine,DeepBlueCTM
分子式 C26H21N3O
CAS號(hào) 70217-82-2
IUPAC名稱 2,8-二芐基-6-苯基-咪唑并[1,2-a]吡唑啉-3-(7H)-1; 1,BISDEOXYCOELENTERAZINE
分子量 391.5 克/摩爾
腔腸400a/Coelenterazine 400a包裝內(nèi)容:
500 ugs – 1 vial of 500 ugs lyophilized CTZ 400a
1 mgs – 2 vials of 500 ugs lyophilized CTZ 400a
5 mgs – 1 vial of 5 mgs lyophilized CTZ 400a
10 mgs – 2 vials of 5 mgs lyophilized CTZ 400a
腔腸400a/Coelenterazine 400a稀釋和發(fā)光測(cè)定:
我們建議在每次使用發(fā)光計(jì)進(jìn)行測(cè)定前新鮮配制工作溶液。
通常情況下,100微摩爾的Coelenterazine 400a溶液適用于大多數(shù)測(cè)定。使用391.5微升的1毫克/毫升的庫(kù)存溶液,并在10毫升您選擇的緩沖液中稀釋(例如PBS),以獲得100微摩爾的溶液。所有溶液應(yīng)在室溫下進(jìn)行。
當(dāng)進(jìn)行板式讀取器測(cè)定,并且您想要比較96孔板中第一孔和最后一孔的相對(duì)光單位(RLU)結(jié)果時(shí),請(qǐng)注意,CTZ在水溶液中會(huì)隨時(shí)間持續(xù)氧化。
腔腸400a/Coelenterazine 400a替代產(chǎn)品:
Prolume/NanoLight開發(fā)了一種磚利底物,其發(fā)光強(qiáng)度是與CTZ-400a相比提高了10倍,并且發(fā)光波長(zhǎng)為407納米。ProlumePurple(PP-CTZ,貨號(hào)369),可以與Renilla熒光素酶及其突變版本(如RLuc8, Rluc3)一起使用。
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