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噻嗪敏感的氯化鈉共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NCC是體內(nèi)主要的NaCl轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白遠(yuǎn)端曲小管(DCT)在維持血壓方面起著重要作用(Rosenbaek等,2014;馮等,2015)。NCC在Thr-53、Thr-58和Ser-71處的磷酸化是NCC功能的重要介質(zhì)(Rosenbaek等人,2014)。NCC按規(guī)定循環(huán)至質(zhì)膜,在刺激后,它可以被磷酸化,從而增加NCC活性并減少NCC內(nèi)吞作用,同時增加DCT中的NaCl轉(zhuǎn)運(yùn)(Feng等人,2015)。
艾美捷抗NCC(噻嗪敏感NaCl共轉(zhuǎn)運(yùn)體)(Thr53)抗體:
目錄編號:p1311-53
宿主物種:兔多克隆
格式:從混合血清中親和純化的抗原
應(yīng)用:WB(Western Blot)1:1000-1:6000,IHC(免疫組化)1:100-1:10,000
測試物種:人、小鼠、大鼠
預(yù)期反應(yīng)性:豚鼠、倉鼠
免疫原:合成的磷酸化肽段,對應(yīng)于小鼠NCC蛋白中Thr53周圍的氨基酸殘基,與鑰匙孔蛤血藍(lán)蛋白(KLH)結(jié)合。
分子量:160 kDa
引用此抗體:PhosphoSolutions 目錄號p1311-53,RRID: AB_2650477
特異性:特異于在Thr53位點(diǎn)磷酸化的約160 kDa NCC蛋白的內(nèi)源性水平。感興趣的條帶可能會因?yàn)樘腔霈F(xiàn)模糊。使用λ-磷酸酶處理可以w全消除免疫標(biāo)記。
生產(chǎn)/純化:通過在磷酸化和非磷酸化肽親和柱上的順序?qū)游?,從混合兔血清中親和純化制備。
質(zhì)量控制:每批進(jìn)行Western blot檢測。
緩沖液:10 mM HEPES(pH 7.5),150 mM NaCl,每毫升100 µg BSA和50%甘油。
儲存:建議在-20°C下儲存,由于含有50%甘油,可以取出小份量而不進(jìn)行凍融循環(huán)。
穩(wěn)定性:自收到日期起,至少在-20°C下穩(wěn)定1年。
抗NCC(噻嗪敏感NaCl共轉(zhuǎn)運(yùn)體)(Thr53)抗體圖例:
左圖:小鼠腎臟裂解物的Western blot結(jié)果顯示,在第一道(-)中特異性免疫標(biāo)記了約160 kDa的NCC蛋白,該蛋白在Thr53位點(diǎn)被磷酸化。第二道(+)顯示了磷酸化特異性,其中免疫標(biāo)記通過與lambda磷酸酶(λ-Ptase,1200單位處理30分鐘)處理膜片被w全消除。
右圖:對WT(野生型)和NCC KO(敲除型)小鼠的PFA灌注冷凍腎臟切片進(jìn)行免疫染色,顯示了在Thr53位點(diǎn)被磷酸化的NCC蛋白的特異性標(biāo)記(目錄號p1311-53,紅色,1:100,000),在頂部可以看到,而在KO(底部)則沒有染色。(圖片由Lauren Miller,Ellison實(shí)驗(yàn)室,OHSU提供。)
抗NCC(噻嗪敏感NaCl共轉(zhuǎn)運(yùn)體)(Thr53)抗體文獻(xiàn)參考:
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