該HGH ELISA用于定量測定人血清中的人類生長激素（HGH）濃度。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品人類生長激素（HGH）ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人類生長激素（HGH）ELISA檢測原理：

這種生長激素（HGH）酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）基于固相酶聯(lián)免疫吸附測定的原理。該測定系統(tǒng)使用羊抗HGH抗體進(jìn)行固相（微孔板）固定，以及在抗體-酶（辣根過氧化物酶）結(jié)合溶液中的小鼠單克隆抗HGH抗體。樣本被允許與抗體同時反應(yīng)，導(dǎo)致HGH分子被夾在固相和酶聯(lián)抗體之間。在室溫下孵育45分鐘后，用水潤洗孔以去除未結(jié)合的標(biāo)記抗體。加入TMB溶液并孵育20分鐘，導(dǎo)致藍(lán)色出現(xiàn)。通過加入1N鹽酸停止顏色發(fā)展，顏色變?yōu)辄S色，并在450納米處用分光光度計(jì)測量。HGH的濃度與測試樣本的顏色強(qiáng)度成正比。

未提供的材料清單

1. 蒸餾水或去離子水

2. 精密移液管：0.05、0.1、0.2 和 1 mL

3. 一次性移液管頭

4. 能夠讀取450nm吸光度的微孔板讀取器

5. 吸水紙

6. 坐標(biāo)紙

7. 漩渦混合器或同等設(shè)備

8. 質(zhì)量控制材料（例如，BioRad Lyphochek對照血清）

9. 計(jì)時器

試劑盒和儀器的儲存

收到后未開封的試劑盒應(yīng)存放在2-8°C的環(huán)境中，微孔板應(yīng)存放在帶有干燥劑的密封袋中，以減少潮濕空氣的接觸。按照上述方法儲存，開封后的試劑盒在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。微孔板讀取器的帶寬應(yīng)為10nm或更小，450nm波長下的光密度范圍應(yīng)為0-2 OD或更大，適用于吸光度測量。

試劑準(zhǔn)備

使用前應(yīng)讓所有試劑達(dá)到室溫（18-25°C）。

測定程序

1. 將所需數(shù)量的包被孔固定在支架中。

2. 將50?L的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對照品移液至相應(yīng)的孔中。

3. 向每個孔中加入100 ?L的酶結(jié)合試劑。

4. c底混合30秒。這一步w全混合非常重要。

5. 在室溫（18-25°C）下孵育45分鐘。

6. 將孵育混合物通過甩動板子內(nèi)容物到廢物容器中移除。

7. 用蒸餾水沖洗微孔板5次，并甩動。

8. 將孔猛擊在吸水紙或紙巾上，以去除所有殘留水滴。

9. 向每個孔中分發(fā)100?L的TMB試劑。輕輕混合10秒。

10. 在室溫下，避光孵育20分鐘。

11. 通過向每個孔中加入100?L的終止液來停止反應(yīng)。

12. 輕輕混合30秒。確保所有的藍(lán)色w全變?yōu)辄S色。

13. 在15分鐘內(nèi)使用微孔板讀取器讀取450nm的吸光度。

結(jié)果計(jì)算

1. 計(jì)算參考標(biāo)準(zhǔn)、對照品和樣本的重復(fù)組的吸光度平均值（A450）。

2. 通過在坐標(biāo)紙上繪制每個參考標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度與其濃度（ng/mL）的線性圖，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，吸光度在垂直（y）軸上，濃度在水平（x）軸上。

3. 使用每個樣本的平均吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的HGH濃度（ng/mL）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線示例

下面展示了一個典型的標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行結(jié)果，其中450nm處的光密度讀數(shù)顯示在Y軸上，而HGH（納克/毫升）顯示在X軸上。注意：標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供說明之用，不應(yīng)用來計(jì)算未知值。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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