補體因子3 ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于檢測小鼠生物樣本中C3的測定。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品 補體因子3(小鼠)ELISA試劑盒，96w。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

補體因子3(小鼠)ELISA試劑盒，96w檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種測定中，樣品中的補體因子3（C3）與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗C3抗體發(fā)生反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗C3抗體。這些酶標記的抗體與之前結(jié)合的C3形成復(fù)合物。經(jīng)過再次洗滌后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中C3的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中C3濃度的量度。測試樣品中C3的量可以從標準曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

樣品收集和處理：

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險。處理和處置時遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣品出現(xiàn)凝塊、嚴重溶血、脂血或樣品完整性受到質(zhì)疑，請記錄并謹慎解釋結(jié)果。

以下列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。樣品穩(wěn)定性尚未評估。

? 血清樣品 - 應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。血凝后通過離心分離血清。取出血清立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

? 血漿樣品 - 應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

? 已知干擾物質(zhì) - 濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應(yīng)。

樣品稀釋：

測定要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行測定時，所有樣品都應(yīng)以雙份進行測定。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋比例應(yīng)基于未知樣品的預(yù)期濃度，以便稀釋后的樣品落在標準曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣品水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋。

? 血清和血漿樣品 - 推薦的起始稀釋比例是1:50,000。要制備1:50,000的樣品稀釋液，將5 ?L的樣品轉(zhuǎn)移到995 ?L的1X稀釋液中。這會產(chǎn)生1:200的稀釋比例。接下來，將1:200的稀釋液通過將4 ?L轉(zhuǎn)移到996 ?L的1X稀釋液中進行稀釋。這會產(chǎn)生1:50,000的稀釋比例。每個階段都要c底混合。

結(jié)果計算：

1. 從所有值中減去平均背景值（標準零的平均吸光度讀數(shù)）。

2. 對每個標準的平均重復(fù)讀數(shù)進行平均，并使用結(jié)果構(gòu)建標準曲線。通過使用能夠生成四參數(shù)邏輯曲線擬合的計算機軟件來減少數(shù)據(jù)來構(gòu)建標準曲線。也可以使用二次多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對數(shù)據(jù)的擬合精度會較低。

3. 從標準曲線中插值得到測試樣品值。校正血清稀釋因子，以得出原始樣品中的C3濃度。

試劑盒中包含一瓶參考血清。有關(guān)批次特定的信息，請參考隨附的產(chǎn)品概況表。請注意以下幾點：

1. 收到參考血清后應(yīng)立即冷凍。如果儲存得當，直到有效期之前都是穩(wěn)定的。

2. 參考血清應(yīng)適當稀釋，以適應(yīng)標準范圍曲線。有關(guān)說明，請參考協(xié)議中的“樣品稀釋"部分。

3. 在移液樣品（程序部分）時，也應(yīng)以雙份移液參考血清。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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