纖維蛋白原ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于檢測人血清和血漿中纖維蛋白原的測定。僅供研究使用。不適用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品纖維蛋白原(人)ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

纖維蛋白原(人)ELISA試劑盒檢測原理：

如圖1所示，在這種測定中，樣品中的纖維蛋白原（FIB）與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗纖維蛋白原抗體發(fā)生反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗纖維蛋白原抗體。這些酶標記的抗體與之前結(jié)合的纖維蛋白形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中纖維蛋白原的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中纖維蛋白原濃度的量度。測試樣品中纖維蛋白原的量可以從標準曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

所需材料但未提供

精密移液器（2微升至1000微升），用于制備和分配稀釋液

試管

微孔板洗滌器/抽吸器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀取器

用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

計時器

離心機（用于樣品收集）

抗凝劑（用于血漿樣品收集）

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險。

處理和處置時遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣品出現(xiàn)凝塊、明顯溶血、脂血或樣品完整性存在問題，請做好記錄并謹慎解釋結(jié)果。

下列樣品收集和儲存條件僅供參考。

未評估樣品的穩(wěn)定性。

血清樣品 - 應(yīng)通過靜脈采血。血凝塊形成后，通過離心分離血清。移除血清并立即進行測定，或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

血漿樣品 - 應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì) - 濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應(yīng)。

樣品稀釋

測定要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行測定時，所有樣品都應(yīng)進行雙重測定。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋比例應(yīng)基于未知樣品的預(yù)期濃度，以使稀釋后的樣品落在標準曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣品水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋。

血清樣品 - 建議的起始稀釋比例為1:200。要制備1:200的樣品稀釋液，將2微升的樣品轉(zhuǎn)移到398微升的1X工作稀釋液中。這會產(chǎn)生1:200的稀釋液。C底混合。

血漿樣品 - 建議的起始稀釋比例為1:10,000。要制備1:10,000的樣品稀釋液，將5微升的樣品轉(zhuǎn)移到495微升的1X工作稀釋液中。這會產(chǎn)生1:100的稀釋液。接下來，將1:100的稀釋液再稀釋，將5微升轉(zhuǎn)移到495微升的1X工作稀釋液中。這會產(chǎn)生1:10,000的稀釋液。每個階段都要C底混合。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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