血紅蛋白檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于檢測大鼠血清和血漿樣本中血紅蛋白的定量測定。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品血紅蛋白(大鼠)ELISA, 96孔。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

血紅蛋白(大鼠)ELISA, 96孔檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理在圖1中表示。在這種測定中，樣品中存在的血紅蛋白與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗血紅蛋白抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結合的抗HM抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的HM形成復合物。經過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB），測定結合的酶。結合的酶量與測試樣品中HM的濃度直接相關；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中HM濃度的量度。測試樣品中HM的量可以從標準曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

試劑準備

使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

? 稀釋液濃縮液

提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，4份dH2O）稀釋1:5。

? 洗滌液濃縮液

提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）稀釋1:20。濃縮液在儲存溫度較低時可能會形成晶體。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體。

? 酶-抗體結合物

通過向每個微孔板測試條中添加10微升酶-抗體結合物到990微升1倍稀釋液中，計算每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量。使用前立即稀釋，并避光保存。均勻但輕柔地混合。避免起泡。

? 預涂覆ELISA微孔板

按提供狀態(tài)使用。打開箔袋，從袋中取出板。取出在測定中不會使用的所有的條和孔，放回袋中并重新密封，連同干燥劑。

? 大鼠HM校準液

根據(jù)批次特定的分析證書進行準備。

未提供的所需材料

? 精密移液器（2微升至100微升），用于制備和分發(fā)稀釋液

? 試管

? 噴霧瓶或微孔板洗滌器/抽吸器

? 蒸餾水或去離子水

? 微孔板讀取器

? 用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

? 計時器

? 樣本收集用的離心機

? 用于血漿樣本收集的抗凝劑

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險。處理和處置時遵循通用預防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝固、嚴重溶血、脂血，或樣本完整性受到質疑，應做記錄并謹慎解釋結果。

以下列出的樣本收集和儲存條件僅供參考。尚未評估樣本穩(wěn)定性。

? 血清樣本 - 應通過靜脈穿刺收集血液。血凝塊形成后通過離心分離血清。取出血清并立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

? 血漿樣本 - 應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

? 已知干擾物質 - 濃度高于0.1%的氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

樣本稀釋

測定要求在測試前對每個測試樣本進行稀釋。每次進行測定時，所有樣本都應以雙份進行測定。推薦的稀釋只是建議。稀釋應基于未知樣本的預期濃度，使稀釋后的樣本落在標準曲線的動態(tài)范圍內。如果不確定樣本水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋。

? 血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋為1:10,000。要準備1:10,000的樣本稀釋，將5微升的樣本轉移到495微升的1倍稀釋液中。這給出1:100的稀釋。接下來，將5微升的1:100稀釋樣本加入到495微升的1倍稀釋液中。這產生1:10,000的樣本稀釋。在每個階段c底混合。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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