詳細介紹
上海雅吉生物的動物組織直接PCR試劑盒(Animal Tissue Direct PCR Kit)可以從鼠尾(mouse tail)、鼠耳(mouse ear)或其它動物組織如口腔取樣棉簽(buccal swabs)、頭發(fā)(hair shafts)、唾液(saliva)等中快速提取和PCR擴增基因組DNA以用于基因型鑒定等。
本試劑盒能快速消化組織樣品獲得基因組DNA,無需機械破碎、有機萃取、柱純化和DNA沉淀,基因組DNA抽提的過程僅需約20分鐘。
動物組織直接PCR試劑盒適用于小鼠等的基因型鑒定(genotyping),大規(guī)模生物樣品的高通量PCR篩選(high-through PCR screening),轉(zhuǎn)基因篩選(transgene screening),基因敲除分析(knockout analysis)和測序(sequencing)。
本試劑盒中提供的Easy-Load™ PCR Master Mix (Blue, 2X)中含有2X Taq DNA Polymerase,2X PCR Buffer,2X dNTP和2X上樣緩沖液,只需加入適量引物、模板和水即可進行PCR擴增,大大簡化了PCR操作,減少了PCR操作過程中可能導(dǎo)致的污染。PCR完成后可以直接上樣電泳,無需再添加上樣緩沖液。
使用本試劑盒進行PCR檢測時僅需極少量的樣品就能完成目的基因的擴增和分析。
使用本試劑盒提取的小鼠尾巴基因組DNA直接PCR的效果可參照圖1。
圖1. 本試劑盒提取的小鼠尾巴基因組DNA直接PCR后的電泳圖。PCR反應(yīng)使用的引物是根據(jù)小鼠GAPDH和HSP70基因序列進行設(shè)計的,泳道1(GAPDH)和2(HSP70)的PCR產(chǎn)物大小分別為299bp和403bp。M, marker。
對于20微升的PCR反應(yīng)體系,本試劑盒的兩種包裝分別可用于100個或500個樣品的直接PCR反應(yīng)。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
D7281S-1 DNA Extraction Solution 9.6ml
D7281S-2 Enzyme Mix 0.4ml
D7281S-3 Stop Solution 10ml
D7281S-4 Easy-Load™ PCR Master Mix (Blue, 2X) 1ml
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,一年有效。DNA Extraction Solution和Stop Solution可以4℃保存,3個月內(nèi)有效。
注意事項:
使用本試劑盒消化小鼠尾巴或其它組織樣品時,一定要確保組織樣品充分浸沒在消化液中。
配制消化液時,DNA Extraction Solution和Enzyme Mix混勻后,應(yīng)盡快使用,放置太久可能會影響DNA抽提效果。
由于PCR反應(yīng)非常靈敏,可以擴增目的基因片段超過1000萬倍,在使用Taq酶時請注意避免微量待擴增DNA的污染,并盡量考慮設(shè)置不加模板的空白對照以確認是否有待擴增DNA的污染。
本試劑盒中的Easy-Load™ PCR Master Mix (Blue, 2X)經(jīng)過15次反復(fù)凍融后仍具有和凍融前幾乎相同的PCR擴增效果,但仍宜適當(dāng)避免過多的反復(fù)凍融,并且在使用前,一定要*融化,并上下顛倒輕輕混勻后才能使用,并盡量避免起泡。
*于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。