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技術文章

豬ELISA試劑盒原理及保存方法

閱讀:579          發(fā)布時間:2020-8-26

豬ELISA試劑盒原理:

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下豬ELISA試劑盒轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品活性。

豬ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中豬ELISA試劑盒避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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