培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
VRT752271是一種可逆的,ATP競(jìng)爭(zhēng)性的ERK1,ERK2抑制劑,對(duì)ERK2的IC50值<0.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):869886-67-9 別名:Ulixertinib 純度:99.86% 分子量:433.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
黃褐牛肝菌cRaf/Raf1抗原Anti-CDY1 AntibodyN-去乙?;?磺基轉(zhuǎn)移3(NDST3)ELISA試劑盒
銅綠假單胞菌MEK1/MAPKK1抗體(N-端)Anti-CDYL2 AntibodyN-去乙?;?磺基轉(zhuǎn)移2(NDST2)ELISA試劑盒
狹旋毛殼促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子Anti-CEACAM21 AntibodyN-去乙?;?磺基轉(zhuǎn)移1(NDST1)ELISA試劑盒
樟疫霉衰老抑制基因抗原Anti-CEBP Delta AntibodyN-聚糖1(NGLY1)ELISA試劑盒
環(huán)形凸臍蠕孢環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原Anti-CEBPD AntibodyN-甲酰甲硫(FMET)ELISA試劑盒
人纖維單胞菌降鈣抗原Anti-CEBPD AntibodyN-甲基嘌呤DNA糖基化(MPG)ELISA試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型C端結(jié)合蛋白1抗原Anti-CEBPE Antibody人心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒
釀酒酵母淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4Anti-CEBPE Antibody人心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒
鹽反硝化枝芽孢桿菌 心肌肌鈣蛋白Anti-CEBPZ Antibody人IL-17 elisa試劑盒
大腸桿菌間隙連接蛋白32抗原Anti-CELA3B Antibody人IL-17 elisa試劑盒
雷丸*間隙連接蛋白36抗原Anti-CEBPG Antibody人原鈣黏1(PCDH1)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌間隙連接蛋白40(多肽)Anti-CELSR1 Antibody人原鈣黏1(PCDH1)ELISA試劑盒
灰色鏈霉菌趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原Anti-CELF1 Antibody人白介2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
楊奇青霉CX3C趨化因子受體1抗原Anti-CELSR2 Antibody人白介2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌周期A抗原Anti-CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒
皺瓣革菌周期B1抗原Anti-CELSR3 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒
核糖核結(jié)合蛋白1抗體脫硫弧菌脫硫亞種(脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌)人急性非B非T淋巴細(xì)胞白血病
PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白GOPC抗體厭氧消化鏈球菌小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞
B淋巴細(xì)胞受體相關(guān)蛋白抗體長(zhǎng)野解普魯蘭桿菌人胃癌細(xì)胞(2013年新引進(jìn))(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
睪丸特異性核苷果糖β抗體Pseudomonastoyotomiensis小鼠骨髓瘤細(xì)胞
ERK1,ERK2抑制劑(VRT752271)二甲胺基基烯酰胺
其他 二甲基基烯酰胺;N-(3-二甲基基)烯酰胺;N,N-二甲基基烯酰胺;N,N-二甲胺基烯酰胺
英文名稱: DMAPAA
其他英文名稱: N,N-Dimethylaminopropyl acrylamide;N-[3-(Dimethylamino)propyl]acrylamide
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 5克/25克/100克
CAS號(hào):3845-76-9
C8H16N2O=156.23
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
性狀:無色液體。沸點(diǎn)142℃ / 12mmHg;閃點(diǎn)140℃;密度0.95g/ml
用途:生化研究。有機(jī)合成
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