操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:K-Ras抑制劑(Oncrasin-1)
英文名稱:Oncrasin-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 Oncrasin-1是高效的抗癌抑制劑,能低濃度下殺死各種K-Ras突變型人肺癌細(xì)胞。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):75629-57-1 純度:98.74% 分子量:269.73 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
巨大芽孢桿菌Psychrobacter aquaticus
雙孢菇Psychrobacter aquimaris
膠孢Psychrobacter celer
芽孢桿菌屬Psychrobacter faecalis
紫蓋蜜環(huán)菌Psychrobacter nivimaris
緊密枝頂孢霉Psychrobacter namhaensis
唾液乳桿菌水楊亞種Psychrobacter proteolyticus
雙環(huán)林地蘑菇Psychrobacter pulmonis
蘋果鏈格孢Psychrobacter vallis
Hymenobacter chitinivoransPusillimonas harenae
柔嫩艾美耳球蟲(chóng)Pusillimonas noertemannii
賴芽胞桿菌屬Pusillimonas soli
巨獸芽孢桿菌Pusillimonas soli
鼠李糖乳桿菌Rahnella aquatilis
膜醭畢赤酵母Ralstonia eutropha
西蕃蓮莖基腐病Rahnella aquatilis
小鼠角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫試劑盒磷化活化復(fù)制因子2抗體人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 紅景天
小鼠角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫試劑盒磷化活化復(fù)制因子2抗體人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 紅景天
小鼠角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫試劑盒磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒紅鏈霉-龍膽二糖苷
小鼠間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒紅杉
K-Ras抑制劑(Oncrasin-1)DL-肉堿鹽鹽
其他混旋肉堿鹽鹽;肉毒堿鹽鹽;DL-鹽肉堿
英文名稱:(±)-Carnitine hydrochloride
其他英文名稱:β-Hydroxy-γ-(trimethylammonio)butyrate hydrochloride;(±)-Carnitine chloride;DL-Carnitine hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):461-05-2
C7H16CINO3=197.66
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
性狀:粉末,溶于水
用途:生化研究。
干燥失重:≤0.25%
性狀:白色針狀結(jié)晶。無(wú)氣味,味微甜而后苦,遇光漸變質(zhì)。溶解度:25℃水約14%,40℃水約26%(水溶液呈中性),25℃乙約2%,沸乙約10%,約0.1%。幾乎不溶于。熔點(diǎn)171.4℃。大吸收波長(zhǎng)(水中)266nm(E1%1cm)378)。半數(shù)致死量(小鼠,腹腔)151mg/kg
用途:生化研究。高效液相色譜熒光檢定?4(4上標(biāo))-3甾類。制藥工業(yè)
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