詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Betulin | 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
商品介紹:
Betulin是一種SREBP抑制劑,在K562細(xì)胞中的IC50值是14.5μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:473-98-3 別名:Trochol 純度:98.0% 分子量:442.72 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
節(jié)桿菌Paenibacillus macerans
桃色枝頂孢Bacillus subtilis
鍺栓孔菌 Paenibacillus polymyxa
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)Paenibacillus polymyxa
斑玉蕈Paenibacillus macerans
鏈霉菌Paenibacillus macerans
草木樨中華根瘤菌Paenibacillus polymyxa
蠟樣芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa
掘氏疫霉*Paenibacillus polymyxa
黃曲霉Bacillus licheniformis
果生鏈核盤菌Paenibacillus polymyxa
泡盛曲霉Paenibacillus polymyxa
櫟生青霉Bacillus cereus
長柄鏈格孢Bacillus cereus
阿維菌鏈霉菌Bacillus cereus
鼠傷寒沙門氏菌Bacillus cereus
磷化指狀蛋白RET抗體草假單胞菌雪白彎頸霉
胰島單克抗體巴利阿里假單胞菌雪白曲霉
磷化雷帕霉靶蛋白復(fù)合體2抗體以色列色鹽桿菌彎孢霉屬菌種
磷化Runx3抗體鹽脫氮枝芽孢桿菌田無鏈霉菌
SREBP抑制劑(Betulin)L-酪叔丁酯
英文名稱:L-Tyrosine tert-butyl ester
其他英文名稱:Tert-Butyl L-tyrosinate;H-Tyr-OtBu
產(chǎn)品規(guī)格:特純,98%
包裝:5克/25克/100克
CAS號:16874-12-7
C13H19NO3=237.29
級別:Puriss
含量:≥99.0%
比旋光度:+25±1°(C= 2% in ethanol)
熔點(diǎn):140~145℃
性狀:至類結(jié)晶粉末。
用途:生化研究。
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