詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CA-074 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
商品介紹:
CA-074是組織蛋白酶B(cathepsin B)的有效抑制劑,Ki值為2to5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):134448-10-5 純度:98.92% 分子量:383.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
干酪菌Saccharomyces cerevisiae
德氏乳桿菌保加利亞亞種Saccharomyces cerevisiae
費(fèi)希爾曲霉Saccharomyces cerevisiae
孟氏假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
棒曲霉Saccharomyces cerevisiae
Bacillus atrophaeusSaccharomyces cerevisiae
磚紅鐮孢Saccharomyces cerevisiae
少根根霉Candida sp.
土脂環(huán)芽胞桿菌(土脂環(huán)桿菌)Saccharomyces cerevisiae
黎巴嫩珊瑚狀放線菌Candida sp.
馬闊里類芽孢桿菌Candida sp.
嗜異生質(zhì)菌Saccharomyces cerevisiae
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Saccharomyces sp.
嗜水氣單胞菌Saccharomyces cerevisiae
間型脈孢菌Saccharomyces sp.
核盤菌 Saccharomyces cerevisiae
小鼠α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒BEND6蛋白抗體人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒山梔苷
小鼠α-黑色激(α-MSH)免疫試劑盒胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒山梔苷甲酯
小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白2抗體人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)ELISA試劑盒山梔子苷B
小鼠α甘露糖苷(α Manase)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白5抗體人抗流行性出血熱病抗體IgG (EHF)ELISA試劑盒山茱萸苷
cathepsin B抑制劑(CA-074)5-硝基鄰菲啰啉
其他5-硝基-1,10-菲啰啉;5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基-1,10-鄰二氮雜菲;5-硝基鄰二氮雜菲;5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基-1,10-菲羅啉;5-硝基-1,10-鄰菲羅啉
英文名稱:5-Nitro-1,10-phenanthroline
產(chǎn)品規(guī)格:AR
包裝:1克/5克
CAS號(hào):4199-88-6
C12H7N3O2•xH2O= 225.20 (anhydrous basis)
級別:AR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):202~204℃
性狀:黃色或橙色結(jié)晶粉末
用途:生化研究。
性狀:紅棕色結(jié)晶粉末,有金屬光澤。易溶于水和乙,微溶于無水乙,不溶于非極性溶劑(如、二甲)。其水溶液呈黃色,當(dāng)度增加時(shí)則由黃變紅,pH6以上溶液變?yōu)樽仙琾H9以上變?yōu)榧t紫色
用途:生化研究。絡(luò)合指示劑。滴定鉍、鎘、鈷、銅、鐵、鎵、銦、鎂、鉛、錳、鎳、釷、鋅。用于鉍、硼、鉻(III)、銅、鈮、銻、錫、鋯、釷的光度測定。紙色譜的噴顯劑
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