商品介紹:
Indirubin-3-monoxime是一種有效的GSK-3β抑制劑,相對較弱的5-Lipoxygenase抑制劑,IC50值分別為22nM和7.8-10μM;同時(shí)對CDK5/p25和CDK1/cyclin B也有作用,IC50值分別為100和180nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:160807-49-8 別名:Indirubin-3-oxime 純度:99.70% 分子量:277.28 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lonsdalea quercina subsp. quercina人抗甲狀腺微粒體抗體Anti-SLC4A1AP Antibody人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒
德曼鏈霉菌小鼠25羥基維生D3Anti-SLC4A1AP Antibody人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒
康寧木霉大鼠白介3Anti-SLC39A9 Antibody人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA試劑盒
橄欖色青霉大鼠白介5Anti-SLC52A1 Antibody人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒
巴氏醋桿菌人抗甲狀腺球蛋白抗體Anti-SLC4A1AP Antibody人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒
盤孢屬小鼠Ⅲ型前膠原肽Anti-SLC52A1 Antibody人異常凝血原(APT)ELISA試劑盒
香菇小鼠維生CAnti-SLC52A2 Antibody人異常凝血原(APT)ELISA試劑盒
泡盛曲霉人谷脫羧自身抗體Anti-SLC52A2 Antibody人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒
無花果擬盤多毛孢大鼠苗條受體Anti-SLC5A2 Antibody人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒
巴氏醋桿菌巴氏亞種人抗血小板抗體IgG/M/AAnti-SLC5A3 Antibody人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒
螢光假單胞桿菌小鼠Ⅱ型膠原Anti-SLC6A15 Antibody人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒
嗜鹽鹽水球形菌大鼠瘦Anti-SLC6A6 Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒
光亮小紅孔菌人抗淋巴球蛋白Anti-SLC5A6 Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒
球孢枝孢大鼠白血病抑制因子Anti-SLC6A16 Antibody人纖溶原(Plg)ELISA試劑盒
死亡谷放線多孢菌小鼠維生B6Anti-SLC6A17 Antibody人纖溶原(Plg)ELISA試劑盒
田頭菇大鼠L選擇Anti-SLC8A1 Antibody人性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒
環(huán)指蛋白92抗體核盤菌M08#15
環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激C蛋白抗體雙色蠟?zāi)ⅲú惶峁㎝12#10
TRIM50蛋白抗體辣椒疫霉菌15A7
環(huán)指蛋白88抗體大馬勃菌LW-5F3
GSK-3β抑制劑(Indirubin-3-monoxime)變色
其他鉻變;1,8-二羥基萘-3,6-二磺;4,5-二羥基-2,7-萘二磺;比色
英文名稱:Chromotropic acid
其他英文名稱:1,8-Dihydroxynaphthylene-3,6-disulfonic acid;4,5-Dihydroxynaphthalene-2,7-disulphonic acid
產(chǎn)品規(guī)格:CP
包裝:25克
CAS號:148-25-4
C10H8O8S2=320.30
級別:CP
靈敏度試驗(yàn):合格
水溶解試驗(yàn):合格
鹽溶解試驗(yàn):合格
性狀:灰針狀結(jié)晶或粉末。接觸空氣易變色。實(shí)際商品常帶有色澤。溶于水
性狀:至灰色、米黃色或淺棕色粉末。接觸空氣易變色,實(shí)際商品常帶有色澤。易溶于水,微溶于乙,溶液呈淺褐色。有刺激性
用途:生化研究。鉻、鈦和甲醛的光度測定。鉻、汞、銀、鈦、氯鹽、甲醛、硝鹽、亞硝鹽的檢定。亞甲二氧基的薄層色譜測定。生物材料中乙二的測定。有機(jī)合成
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