培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:JSH-23 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg JSH-23是一種NF-κB抑制劑,IC50值為7.1μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:749886-87-1 純度:99.10% 分子量:240.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
雜色曲霉鵝細(xì)小病GPV抗體Human TOMM6 ELISA Kit大鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)免疫試劑盒
鉛色青霉胃泌/蛙皮抗體Human TOMM34 ELISA Kit大鼠絨毛膜促性腺激(CG)免疫試劑盒
大麗輪枝孢3-磷甘油脫氫(兔來源免疫組化用抗體)Human MT ELISA Kit大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒
余氯速測盒(檢測范圍0~1mg/L)膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體Human TOMM7 ELISA Kit大鼠熱休克因子1(HSF1)免疫試劑盒
根瘤菌β半乳糖苷抗體Human TOP3A ELISA Kit大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)免疫試劑盒
大腸埃希菌gamma基丁B型受體1抗體Human TNS1 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)免疫試劑盒
細(xì)黃鏈霉菌乳糖變種G蛋白/鳥苷結(jié)合蛋白抗體Human TNIP2 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
托姆青霉GDNF家族受體α4抗體 GDNFRα4Human TNIP1 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母神經(jīng)節(jié)肽抗體Human TNS3 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白47(HSP47)免疫試劑盒
鳳尾菇谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移抗體Human TNS4 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體Human TMOD3 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒
醋鈣不動桿菌甘肽受體1抗體Human MCHR2(Melanin-concentRating hormone receptor 2) ELISA Kit大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)免疫試劑盒
雙孢蘑菇生長抑制DNA損傷基因34抗體Human TNK1 ELISA Kit大鼠缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒
發(fā)酵乳桿菌生長分化因子1抗體Human TNP1 ELISA Kit大鼠固(ALD)免疫試劑盒
柳巴克利酵母葡萄糖激抗體Human TMPRSS5 ELISA Kit大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)免疫試劑盒
汞對照液G蛋白偶聯(lián)受體78抗體Human EEF1A1(Elongation factor 1-alpha 1) ELISA Kit大鼠去乙酰化饑餓激(dGHRL)免疫試劑盒
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:光譜純 ,≥99%甜橙黃
: HBUM80981資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:for spectroscopy,≥99.5%番瀉苷元B
山茶刺盤孢Colletotrichum│coccodes (Wallr.) S. Hughes 質(zhì)量規(guī)格:SP番瀉苷元A
NF-κB抑制劑(JSH-23)磷轉(zhuǎn)乙?;?/span>
其他磷乙酰轉(zhuǎn)移
英文名稱:Phosphotransacetylase from Bacillus stearothermophilus
其他英文名稱:Acetyl-CoA:orthophosphate acetyltransferase, Phosphate acetyltransferase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,3000u/mg
包裝:5KU
CAS號:9029-91-8
級別:BR
活力:≥3000units/mg protein (biuret)
活力定義:One unit will convert 1.0 μmole of CoA to acetyl CoA per min at pH 7.4 at 25 °C using acetyl phosphate as substrate
Protein:≥20%
性狀:粉末
用途:生化研究。供效價(jià)測定
PH:9.0~10.7
E1%1cm 405nm:≥568
消光比值(E405nm/E630nm):3.20~4.0
總銅(Cu):4.0~6.0%
游離銅(Cu):≤0.025
建議用量:一般使用量為0.001~0.1%
性狀:墨綠色粉末或墨綠色液體,以天然植物為原料,經(jīng)過精制加工提純所得到的天然葉綠衍生物。易溶于水,略溶于乙和,水溶液綠色透明,無沉淀
用途:生化研究。
保存:RT,避光