操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:多重激酶抑制劑(R1530)
英文名稱:R1530 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 R1530是多重激酶抑制劑,具有抗血管生成和抗腫瘤的活性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):882531-87-5 純度:98.73% 分子量:356.78 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
岸喜鹽芽孢桿菌Azotobacter vinelandii
葡萄生木層孔菌Acetobacter pasteurianus
腸膜明串珠菌Lactobacillus plantarum
鮑氏不動(dòng)桿菌Lactobacillus plantarum
大腸埃希氏菌Mycobacterium fortuitum
雜色曲霉原變種Mycobacterium fortuitum
盤長(zhǎng)孢狀盤孢Paenibacillus polymyxa
小平菇(秀珍菇)Paenibacillus polymyxa
科恩根霉Paenibacillus polymyxa
柱孢Micrococcus luteus
Ensifer fredii
巨型艾美耳球蟲Bradyrhizobium japonicum
普通變形菌Lactobacillus casei
肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種Paenibacillus polymyxa
紅細(xì)菌屬Paenibacillus polymyxa
毛霉屬Corynebacterium crenatum
豬可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒磷化A-Raf抗體人堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒朝藿定B
豬可溶性P選擇(sP-Selectin)免疫試劑盒紅腺苷脫3抗體人堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒朝藿定C
豬抗中性粒彈性蛋白抗體(ANEA)免疫試劑盒雄激結(jié)合蛋白抗體人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒車葉草苷
豬巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒肝再生增強(qiáng)因子抗體人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒橙花
多重激酶抑制劑(R1530)D-色甲酯鹽鹽
英文名稱:D-Tryptophan methyl ester hydrochloride
其他英文名稱:Methyl (2R)-2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoate hydrochloride;(S)-2-Amino-3-(1H-indol-3-yl)-propionic acid methyl ester hydrochloride;H-D-Trp-OMe.HCl
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:5克/25克/100克
CAS號(hào):14907-27-8
C12H14N2O2=254.71
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):218~220℃
比旋光度:-17~-18o(CH3OH)
性狀:結(jié)晶粉末
用途:生化研究
保存:RT