培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:AMG 232 產(chǎn)品規(guī)格:2mg|5mg|10mg|50mg|100mg AMG232是一種有效的p53-MDM2相互作用抑制劑,在SJSA-1細胞中,IC50值為9.1nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1352066-68-2 純度:99.73% 分子量:568.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
異常威克漢姆酵母磷化絲裂原活化蛋白激ERK抗體Human JUN(Transcription factor AP-1) ELISA Kit犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒
石面單胞菌屬CD312抗體Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)免疫試劑盒
野野村氏菌屬eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human COQ3 (Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase, mitochondrial) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化表皮生長因子受體抗體Human RBBP4 (Histone-binding protein RBBP4) ELISA KIT犬血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)免疫試劑盒
堆肥鞘桿菌磷化表皮生長因子受體抗體Human HN1L (Hematological and neurological expressed 1-like protein) ELISA KIT犬血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒
堅強芽孢桿菌肝配蛋白A1受體抗體Human OTX1 (Homeobox protein OTX1) ELISA KIT犬血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒
根瘤菌真核翻譯起始因子2C2抗體Human HCST (Hematopoietic cell signal transducer) ELISA KIT犬血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體Human HORMAD2 (HORMA domain-containing protein 2) ELISA KIT犬血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌EYA4蛋白抗體Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體Human GADD45G (Growth arrest and DNA damage-inducible protein GADD45 gamma) ELISA KIT犬胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒
紫孢側(cè)耳(美味側(cè)耳)吞噬運動蛋白2抗體Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit犬胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌紅膜條帶4.1蛋白抗體Human HARBI1 (Putative nuclease HARBI1) ELISA KIT犬心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒
pQE31磷化紅生成受體抗體Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) ELISA KIT犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
毛殼轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體Human HAND1 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 1) ELISA KIT犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
小鼠小短桿菌膠質(zhì)谷運載蛋白4抗體Human HAND2 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 2) ELISA KIT犬纖溶原激活物抑制劑1(SERPINE1)免疫試劑盒
巴斯德畢赤酵母erbB3結(jié)合蛋白1抗體Human GRTP1 (Growth hormone-regulated TBC protein 1) ELISA KIT犬細小病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒
腸膜狀明串珠菌Leuconostoc│mesenteroides 質(zhì)量規(guī)格:鹽野靛堿
皺紋假單胞菌Pseudomonas│corrugata 質(zhì)量規(guī)格:濕楊芽黃
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:干鴉膽子D
p53-MDM2相互作用抑制劑(AMG 232)氯化銫
英文名稱:CSCl
其他英文名稱:Cesium Chloride;Caesium chloride
產(chǎn)品規(guī)格:生物技術(shù)級,99.5%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:7647-17-8
CSCl=168.36
級別:Biotechnology Grade
Assay:≥99.5%
Abs.@260nm (50%, Water):≤0.1
Potassium:≤0.05%
Nickel:≤0.0001%
Magnesium:≤0.0001%
Lithium:≤0.005%
Sodium:≤0.1%
DNase&RNase:None
Protease:None
性狀:粉末。有吸濕性。易溶于水,溶于乙,不溶于。相對密度3.99。熔點646℃。1290℃升華。沸點1303℃。折光率1.6418。半數(shù)致死量(大鼠,腹腔)1.5g/kg
用途:生化研究。點滴分析三價鉻和鎵。無線電、電視機真空管后的抽成真空。X射線熒光屏。無線電反襯介質(zhì)。銫。氣相色譜固定液(高使用溫度450℃,溶劑為水),用于高溫色譜分析二聯(lián)、三聯(lián)。用于顯微鏡分析,密度梯度離心
保存:RT