詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Nampt-IN-1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
LSN3154567是一種新型NAMPT抑制劑,作用于NCI-H1155,Calu-6,HCC1937,和MCF-7細(xì)胞,IC50值分別為18nM,49nM,333nM,和389nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1698878-14-6 純度:98.99% 分子量:419.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
哈茨木霉Bacillus subtilis subsp. subtilis植物維生B12(VB12)ELISA試劑盒
科赫芽胞桿菌Paenibacillus polymyxa植物維生A(VA)ELISA試劑盒
大腸埃希菌Geobacillus stearothermophilus植物維生A(VA)ELISA試劑盒
釀酒酵母Bacillus licheniformis植物維生E(VE)ELISA試劑盒
疣梗青霉Geobacillus stearothermophilus植物維生E(VE)ELISA試劑盒
變異鏈球菌Paenibacillus macerans植物維生D2(VD2)ELISA試劑盒
蠟樣芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa植物維生D2(VD2)ELISA試劑盒
三方氏酵母Geobacillus stearothermophilus植物維生D3(VD3)ELISA試劑盒
墻壁圣格奧爾根菌Paenibacillus macerans植物維生D3(VD3)ELISA試劑盒
地衣芽孢桿菌Paenibacillus macerans植物維生D(VD)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌Bacillus coagulans植物維生D(VD)ELISA試劑盒
栗褐鏈霉菌Paenibacillus macerans植物維生B6(VB6)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌Paenibacillus macerans植物維生B6(VB6)ELISA試劑盒
北京棒桿菌Paenibacillus macerans植物25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
大腸埃希菌Paenibacillus macerans植物25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
列氏糖霉菌Paenibacillus macerans植物維生C(VC)ELISA試劑盒
陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體漢氏葡糖醋桿菌馬爾他布魯氏菌
糖皮質(zhì)激調(diào)節(jié)激1抗體羅氏乳桿菌綿羊附睪種布魯氏菌
泛連接Siah2斑點(diǎn)氣單胞菌豚鼠亞種豬布魯氏菌
核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體阿普利亞小單孢菌豬布魯氏菌 生物Ⅱ型
NAMPT抑制劑(Nampt-IN-1)L-組鹽鹽一水物
其他鹽組;L-氫氯組一水物
英文名稱:H-His-OH.HCl
其他英文名稱:L-α-Amino-β-(4-imidazolyl)propionic acid monohydrochloride;L-Histidine Hydrochloride Monohydrate;L-Histidine monohydrate monohydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:5934-29-2
C6H9N3O2•HCl•H2O=209.63
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+8.5o~+10.5o
鉛:≤5ppm
干燥失重:≤0.30%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.10%
性狀:結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,無臭,稍苦味。易溶于甲,溶于水,不溶于乙
用途:生化研究。組織胺(histamine)的前體物質(zhì),依靠組脫羧(histidine decarboxylase)
保存:RT