培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
突變體EGFR變構(gòu)抑制劑 | EAI045 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
EAI045是突變體EGFR變構(gòu)抑制劑,在10μM ATP時(shí)抑制EGFR,EGFRL858R,EGFRT790M和EGFRL858R/T790M的IC50值分別為1.9,0.019,0.19和0.002μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1942114-09-1 純度:99.33% 分子量:383.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
南游動(dòng)球菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3抗體(TGFβ3)Anti-KIF20B Antibody嗜粒趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
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丁梭菌按蚊硫酯包含蛋白-1抗體Anti-KIT Antibody視網(wǎng)膜母瘤蛋白1(RB1)ELISA試劑盒
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單胞菌屬促甲狀腺受體抗體(C端)Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫15(RDH15)ELISA試劑盒
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豬丹絲菌磷化NF-κB活化激抗體Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫13(RDH13)ELISA試劑盒
信號(hào)肽肽SPP抗體具核梭桿菌聚核亞種大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運(yùn)3抗體巴氏芽孢桿菌大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞
核轉(zhuǎn)錄因子SOX22抗體艱難梭菌大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
核轉(zhuǎn)錄因子SOX4抗體出血性大腸埃希氏菌 O157:H7大鼠支氣管成纖維細(xì)胞
突變體EGFR變構(gòu)抑制劑癸乙酯
其他 羊蠟乙酯;正癸乙酯
英文名稱: Ethyl caprate
其他英文名稱: Ethyl decanoate
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包 裝: 25毫升/100毫升/500毫升
CAS號(hào):110-38-3
C12H24O2=200.32
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
沸點(diǎn):245~25℃
折光率:1.425
密度:0.862 g/ml at 25℃
性狀:無色液體。能與無水乙、混溶,不溶于水。閃點(diǎn) 102℃。
用途:生化研究。食品添加劑,白蘭地酒香精
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