培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MNK1和MNK2抑制劑(eFT508) | eFT508 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱(chēng):eFT508 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg eFT508是一種高效,高選擇性,可MNK1和MNK2抑制劑,其IC50值均為1-2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1849590-01-7 純度:99.49% 分子式:C??H??N?O? 分子量:340.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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丁梭菌A型病H5N1-M2蛋白抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA Kit倉(cāng)鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒
中華根瘤菌透明質(zhì)/玻璃抗體Human SERPINB9 ELISA Kit倉(cāng)鼠巨噬遷移抑制因子(MIF)免疫試劑盒
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%秦皮苷
洋蔥伯克霍爾德氏菌Burkholderia│cepacia 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品高麗槐
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%紫蓳靈
MNK1和MNK2抑制劑(eFT508)鄰二甲氫鉀
其他 二甲氫鉀;酞?dú)溻洠?/span>1,2-二甲氫鉀;1,2-二甲單鉀鹽
英文名稱(chēng): Potassium hydrogen phthalate
其他英文名稱(chēng): Potassium acid phthalate;Phthalic acid potassium acid salt;Phthalic acid monopotassium salt
產(chǎn)品規(guī)格: 基準(zhǔn)試劑
包裝:50克
產(chǎn)品規(guī)格: GR,99.8%
包裝:500克
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.8%
包裝:500克
CAS號(hào):877-24-7
C8H5KO4=204.22
級(jí)別:PT
含量:99.95~100.05%
pH(50g/L,25℃):3.8~4.2
重金屬:≤0.0005%
氯化物:≤0.002%
澄清度試驗(yàn):合格
總硫化合物:≤0.006%
水不溶物:≤0.003%
鈉:≤0.005%
鐵:≤0.0005%
級(jí)別:GR
含量:≥99.8%
水不溶物:≤0.03%
鈉:≤0.01%
銨:≤0.003%
鐵:≤0.0003%
級(jí)別:AR
含量:≥99.8%
澄清度試驗(yàn):≤4號(hào)
干燥失量:≤0.05%
水不溶物:≤0.005%
鈉:≤0.01%
性狀:無(wú)色單斜結(jié)晶結(jié)晶性粉末。在空氣中穩(wěn)定。溶于約12份冷水、3份沸水,微溶于乙。溶液呈性。25℃ 0.05mol/L水溶液的pH為4.005。相對(duì)密度(d254)1.636。熔點(diǎn)295~300℃(分解)。
用途:生化研究。分析試劑。標(biāo)定堿的基準(zhǔn)。配制緩沖溶液
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