培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Radotinib(IY-5511)是酪氨酸激酶Bcr-Abl1新型選擇性抑制劑,對(duì)野生型Bcr-Abl1的IC50值為34nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):926037-48-1 別名:IY-5511;Supect 分子量:530.5 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
弗氏假絲酵母Candida sp.
鏈霉菌Candida sp.
腸桿菌Saccharomyces cerevisiae
Pseudochrobactrum asaccharolyticumSaccharomyces cerevisiae
羊肚菌(不能訂購(gòu))Rhodotorula minuta
真姬菇Pichia anomala
蠟狀芽孢桿菌Saccharomyces sp.
大清壩寡食桿菌Saccharomyces sp.
假堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
葫蘆小叢殼*Saccharomyces cerevisiae
雜硅鹽礦物節(jié)桿菌Saccharomyces cerevisiae
黑曲霉Saccharomyces cerevisiae
費(fèi)氏中華根瘤菌Saccharomyces cerevisiae
美澳型核果褐腐病菌Saccharomyces cerevisiae
柯奈尼亞小單孢菌Saccharomyces cerevisiae
發(fā)酵畢赤酵母Saccharomyces sp.
小鼠S100-B蛋白(S100B)免疫試劑盒腦組織表達(dá)X連鎖蛋白1抗體人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒石斛堿
小鼠RAR的相關(guān)孤獨(dú)受體C(RORC)免疫試劑盒B淋巴連接蛋白抗體人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒石榴皮鞣
小鼠Qa淋巴抗原2(Qa-2)免疫試劑盒磷化T淋巴連接蛋白抗體人(Coronaviruses IgG)ELISA試劑盒石杉?jí)A甲
小鼠P選擇(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒Bcr抗體人(Coronaviruses IgG)ELISA試劑盒石杉?jí)A乙
Bcr-Abl1抑制劑(Radotinib)5-尿苷一磷二鈉鹽
其他尿苷-5′-單磷二鈉鹽;一磷尿苷鈉鹽;尿苷二鈉;尿甙二鈉
英文名稱:5′-UMP,2Na
其他英文名稱:Uridine 5′-monophosphate disodium salt;Disodium uridine-5'-monophosphate;Uridylic acid disodium salt
產(chǎn)品規(guī)格:超純,98%
包 裝: 1克/5克/25克/100克
CAS號(hào):3387-36-8
C9H11N2Na2O9P=368.15
級(jí)別:Ultra Pure Grade
含量:≥98.0%(HPLC)
硫鹽:≤0.01%
重金屬:≤10ppm
性狀:粉末
用途:生化研究。P2Y受體激動(dòng)劑
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