培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ATM抑制劑(KU-55933) | KU-55933 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:KU-55933 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg KU-55933是一種有效的ATM抑制劑,IC50和Ki值分別為12.9和2.2nM;對ATM的選擇性比對DNA-PK,PI3K/PI4K,ATR和mTOR高。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:587871-26-9 純度:99.67% 分子量:395.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
暗蓋淡鵝膏菌GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子α/GABP-α抗體Human TMEM16A/DOG1 ELISA Kit大鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
巨大芽胞桿菌GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體Human TMEM175 ELISA Kit大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)免疫試劑盒
耐久腸球菌谷脫羧65+谷脫羧67抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA Kit大鼠凝血因子XIV(FXIV/protein C)免疫試劑盒
塔賓曲霉谷脫羧樣蛋白1抗體Human TMEM176A ELISA Kit大鼠凝血因子IX(FIX)免疫試劑盒
分枝節(jié)桿菌葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體Human TMEM102 ELISA Kit大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒
淺天青鏈霉菌α葡萄糖苷/溶體α-葡糖苷抗體Human TMEM176B ELISA Kit大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒
Sporosarcina生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白3抗體Human TMEM108 ELISA Kit大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒
盤長孢狀盤孢生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4抗體Human TMEM161A ELISA Kit大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
淺白隱球酵母G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體Human TMEM168 ELISA Kit大鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌磷化G基丁B型受體2抗體Human TMEM165 ELISA Kit大鼠凝血受體(TR)免疫試劑盒
棉阿舒囊霉G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α11/Gα 11 抗體Human TMEM16A/DOG1 ELISA Kit大鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
Lactobacillus brevisG3BP2蛋白抗體Human TLE1 ELISA Kit大鼠凝血抗凝血Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒
檸檬色短小桿菌γ基丁運(yùn)載蛋白2抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA Kit大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒
游動(dòng)放線菌*β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移3抗體Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) ELISA Kit大鼠凝聚(CLU)免疫試劑盒
格氏嗜鹽堿桿菌β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移7抗體Human TM7SF3 ELISA Kit大鼠檸檬合(CS)免疫試劑盒
大腸埃希菌γ-微管蛋白GCP4抗體Human TM9SF4 ELISA Kit大鼠尿液三葉因子3(TFF-3)免疫試劑盒
棲珊瑚假交替單胞菌Pseudoalteromonas│paragorgicola 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品基蓮心堿
貝倫格葡萄座腔菌Botryosphaeria│berengeriana De Not. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品基酞
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品桑皮苷C
ATM抑制劑(KU-55933)磷三鈉
其他 正磷鈉;十二水磷鈉;磷三鈉十二水合物
英文名稱: TSP
其他英文名稱: sodium phosphate;Sodium phorhoate tribaric dodecahydrate;Trisodium Phosphate dodecahydrate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
包裝:500克
CAS號:10101-89-0
Na3PO4•12H2O=380.12
級別:AR
含量:≥98.0%
澄清度試驗(yàn):合格
二鈉鹽:≤0.5%
硫鹽:≤0.01%
氯化物:≤0.005%
砷:≤0.0003%
游離堿:≤1.5%
總氮量:≤0.002%
鐵:≤0.0005%
重金屬:≤0.001%
性狀:結(jié)晶,能溶于水。水溶液呈性。急熱到約75℃熔融,在100℃時(shí)失去11分子結(jié)晶水,到200℃時(shí)也不*脫水。熔于3.5份水和1份沸水,不溶于乙。在水溶液中幾乎*分解為磷氫二鈉和氫氧化鈉,有強(qiáng)堿性,0.1%溶液的pH為11.5。微毒,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)7.40g/kg。有腐蝕性。水中溶解度:258 G/L(20°C)。密度:1.62;熔點(diǎn):75℃
用途:生化研究。軟水劑,照相顯影劑,清潔劑
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