詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Flumatinib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Flumatinib是多種激酶抑制劑,對(duì)c-Abl,PDGFRβ和c-Kit的IC50為1.2nM,307.6nM和2662nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):895519-90-1 純度:99.83% 分子量:562.59 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
慢葡萄球菌Sporosarcina aquimarina
竹針孢座囊菌Virgibacillus pantothenticus
嬰兒配方乳粉 、鈉、鈣、鎂、銅、鐵、鋅、磷、 、氯Marinococcus halophilus
果生鏈核盤菌Paenibacillus lautus
異常威克漢姆酵母Geobacillus kaustophilus
水叢毛單胞菌Delftia tsuruhataensis
節(jié)狀鐮孢厚垣變種Paenibacillus amylolyticus
拜科羅爾紅球菌Paenibacillus alvei
庫(kù)爾勒海洋桿菌Paenibacillus chondroitinus
乳桿菌屬Paenibacillus larvae
*蛹蟲草Shewanella putrefaciens
植物乳桿菌Shewanella baltica
枯草芽孢桿菌Arthrobacter ardleinus
草莖點(diǎn)霉Paenibacillus alginolyticus
構(gòu)巢裸胞殼Sporosarcina pasteurii
假單胞菌Alcanivorax dieselolei
磷化神經(jīng)突觸1抗體嗜二氧雜環(huán)乙烷假諾卡氏菌赭石馬杜拉放線菌
磷化信號(hào)淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體大腸埃希氏菌DH5α/pET30a-PknB褶皺鏈霉菌
磷化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體大腸埃希氏菌DH5a/phA3G-EGFP針孢鏈霉菌
膽鹽磺基轉(zhuǎn)移高溫單孢菌屬粘鞭菌屬菌
多種激酶抑制劑(Flumatinib)L-精
其他2-基-5-胍基戊;L-蛋白基;L-胍基戊;L-2-基-胍基戊
英文名稱:L-Arginine
其他英文名稱:L-1-Amino-4-guanidovaleric acid;L-2-Amino-5-guanidinovaleric acid;L-α-Amino-δ-guanidovaleric acid;L-Guanidine aminovaleric acid;Nδ-Amidino-L-ornithine
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):74-79-3
C6H14N4O2=174.2
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:26.9~27.9o
PH:10.5~12.0
氯化物:≤0.02%
銨鹽:≤0.02%
硫鹽:≤0.02%
鐵:≤10ppm
重金屬:≤10ppm
砷鹽:≤1ppm
干燥失重:≤0.5%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%
性狀:結(jié)晶粉末或棱形結(jié)晶,從乙中析出的為無水單斜片狀結(jié)晶。溶于水,微溶于乙。具強(qiáng)堿性,水溶液能從空氣中吸收二氧化碳。水中溶解度: 148.7 g/l (20°C)
用途:生化研究。一氧化氮合成底物,能轉(zhuǎn)換為瓜和NO。靠一種依賴于NO的機(jī)制誘導(dǎo)胰島分泌
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