培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ALK4/ALK5抑制劑 | EW-7197 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:EW-7197 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg EW-7197是一個(gè)強(qiáng)的,有選擇性的TGF-β receptor ALK4/ALK5抑制劑,IC50值分別是13nM和11nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1352608-82-2 純度:99.12% 分子式:C??H??FN? 分子量:399.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
茄鐮孢14號(hào)染色體開放閱讀框94抗體Human SEPHS1 ELISA Kit倉鼠E選擇(SELE)免疫試劑盒
交鏈孢屬四磷鳥苷水解抗體Human BGN(Biglycan) ELISA Kit駱駝ELISA試劑盒
假絲酵母屬人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp36抗體Human SERAC1 ELISA Kit駱駝轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌激上調(diào)神經(jīng)腫瘤相關(guān)激抗體Human SERINC2 ELISA Kit駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)免疫試劑盒
雙孢蘑菇β基己糖苷A抗體Human SERINC1 ELISA Kit駱駝天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
空腸彎曲桿菌肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白HECW1抗體Human SERF2 ELISA Kit駱駝過氧化氫免疫試劑盒
煙色毛霉3-羥甲雙加氧抗體Human SEMA3C ELISA Kit駱駝谷胱甘肽過氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒
Gillisia limnaea舞蹈癥相關(guān)蛋白40/凝血因子8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體Human SELK ELISA Kit駱駝基轉(zhuǎn)移(ALT)免疫試劑盒
大腸埃希菌舞蹈癥相關(guān)相互作用蛋白1/雌激相關(guān)受體樣蛋白1抗體Human SEMA4B ELISA Kit駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒
柳巴克利酵母舞蹈癥蛋白相互作用蛋白13抗體Human SEMA3D ELISA Kit裸鼠ELISA試劑盒
德爾布有孢酵母神經(jīng)性舞蹈病蛋白抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit裸鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
綠針假單胞菌舞蹈癥相關(guān)蛋白1抗體Human SEMA4A ELISA Kit裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒
黃多孔菌亨廷頓(舞蹈癥)相互作用蛋白1抗體Human SEC61alpha ELISA Kit裸鼠環(huán)加氧2(COX-2)免疫試劑盒
糞腸球菌葡萄糖氧化1抗體Human SDSL ELISA Kit驢ELISA試劑盒
阿孫鏈霉菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子HOXD9抗體Human SEC11A ELISA Kit驢孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
同絲毛殼羥基酰谷胱甘肽水解樣蛋白抗體Human SEC13 ELISA Kit驢透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
節(jié)葡萄孢霉屬Gonatobotrys│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品化矢車菊
紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.99矢車菊-3-O-葡萄糖苷
大腸埃希氏菌DH5a/pET30a/sigH M.SmegmatisEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品左旋肉堿
ALK4/ALK5抑制劑鄰二甲二異壬基酯
其他 鄰二羧-二-C8-10支鏈烷基酯;鄰二甲二壬烷;鄰二甲二異壬酯;增塑劑DINP;鄰酞二異壬酯;1,2-二甲二異壬酯
英文名稱: DINP
其他英文名稱: Diisononyl phthalate;1,2-Benzenedicarboxylic acid di-C8-10-branched alkyl esters C9-rich
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
包 裝: 250毫升/1升
CAS號(hào):68515-48-0
C26H42O4=418.62
級(jí)別:AR
含量:≥99.0%(C9異構(gòu)體的混合物)
比重:0.973~0.977
折光率:1.484~1.488
鄰二甲二辛酯:≤0.15%
性狀:無色或淡黃色油狀液體。不溶于水,溶于脂肪族和芳香族烴類。揮發(fā)性低于DOP。有良好的耐熱性。沸點(diǎn):252℃(0.67kPa);閃點(diǎn):213℃
用途:生化研究。DINP為優(yōu)良的通用、無毒型主增塑劑,主要用于聚氯乙烯、氯乙烯共聚物、乙基纖維和合成橡膠等。本品與聚氯乙烯相溶性好,揮發(fā)性、遷移性低,增塑效率高,性能優(yōu)于DOP,具有優(yōu)良的耐熱性、耐光性、耐老化和電絕緣性。在玩具膜、電線、電纜中得到廣泛應(yīng)用
保存:RT