培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Hsp90抑制劑 | Alvespimycin hydrochloride | 1mL(10mM)|10mg|25mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
Alvespimycin hydrochloride是一種有效的Hsp90抑制劑,結(jié)合到Hsp90,EC50為62±29nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):467214-21-7 別名:17-DMAG;KOS-1022;NSC 707545 純度:99.32% 分子量:653.21 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
孢小克銀漢霉泛蛋白連接D1抗體Anti-LOXL1 Antibody神經(jīng)調(diào)節(jié)3(NRG3)ELISA試劑盒
褐球固氮菌泛蛋白連接C抗體Anti-LPA(Apo A) Antibody神經(jīng)調(diào)節(jié)2(NRG2)ELISA試劑盒
油菜菌核病菌泛蛋白連接E2I抗體Anti-LPAR6 Antibody神經(jīng)調(diào)節(jié)1(NRG1)ELISA試劑盒
皮狀假絲酵母泛蛋白連接D2抗體Anti-LPXN Antibody神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)ELISA試劑盒
糞腸球菌泛蛋白連接G2抗體Anti-LPP Antibody神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)ELISA試劑盒
白地霉泛蛋白連接L3抗體Anti-LPP Antibody神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)ELISA試劑盒
路德類酵母泛蛋白連接2N抗體Anti-LPP Antibody神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒
雞傷寒沙門氏菌葡萄糖神經(jīng)酰合成抗體Anti-LRIG1 Antibody神經(jīng)肽W(NPW)ELISA試劑盒
耐鹽枝孢菌泛結(jié)合E2樣蛋白抗體Anti-LRIG3 Antibody神經(jīng)肽VF(NPVF)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種尿嘧啶核苷磷化1抗體Anti-LRP5 Antibody神經(jīng)肽S受體(NPSR)ELISA試劑盒
纖維纖維單胞菌肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白相關(guān)蛋白1抗體Anti-LRP1 Antibody神經(jīng)肽S(NPS)ELISA試劑盒
AuranobacterUL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體Anti-LRP6 Antibody神經(jīng)肽FF(NPFF)ELISA試劑盒
喬木鏈格孢UL16結(jié)合蛋白2抗體Anti-LRPPRC Antibody神經(jīng)肽B(NPB)ELISA試劑盒
白黃鏈霉菌尿苷酰二磷葡萄糖焦磷化2抗體Anti-LRRC32 Antibody神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白2(NINJ2)ELISA試劑盒
Rhizobiales質(zhì)子梯度調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-LRRK2 Antibody神經(jīng)損傷誘導(dǎo)蛋白1(NINJ1)ELISA試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種泛結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Anti-LSM2 Antibody神經(jīng)絲束蛋白(NPTN)ELISA試劑盒
微管卷曲蛋白SYNC抗體弗勞地檸檬桿菌大鼠腎成纖維細(xì)胞
鈉通道亞基β4抗體普通擬桿菌大鼠尿道上皮細(xì)
基質(zhì)交感分子1抗體嗜熱棲熱菌大鼠輸尿管上皮細(xì)胞
血清淀粉樣蛋白4抗體高加索奶乳桿菌大鼠腎管狀上皮細(xì)胞
Hsp90抑制劑硅油I
其他 甲基硅油255;基硅油;23%~25%基;基硅油I;基甲基硅油I;聚硅氧烷;二甲聚硅氧烷;有機(jī)硅油;二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷);硅;有機(jī)硅樹脂;甲基硅樹脂;聚二甲基硅氧烷;硬泡硅油
英文名稱: Silicone
其他英文名稱: Poly(dimethylsiloxane);Silicone oil;Silicone oil I
產(chǎn)品規(guī)格: 色固
包 裝: 100克
CAS號(hào):63148-62-9
級(jí)別:色固
流失試驗(yàn):合格
高使用溫度:200℃
性狀:無(wú)色透明油狀液體。為中等基含量的硅油。不溶于水。相對(duì)密度(d204)1.07。凝固點(diǎn)-40℃。折光率(n20D)1.487。閃點(diǎn)>300℃。黏度100~200×10-6m2/s
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度200℃)。
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