操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:MDM2/p53抑制劑(Nutlin 3b)
英文名稱:Nutlin 3b 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg 發(fā)貨周期:1~3天 Nutlin-3b是MDM2/p53抑制劑,IC50為13.6μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:675576-97-3 別名:Nutlin-3b 純度:98.01% 分子量:581.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
小孢毛鬼傘Candida rugosa
小孢矛束霉Candida rugosa
乳乳球菌乳脂亞種Yarrowia lipolytica
韓國海桿狀菌Yarrowia lipolytica
Leifsonia shinshuensis Suzuki et al.Yarrowia lipolytica
日本根霉Candida rugosa
大腸桿菌Sporidiobolus salmonicolor
埃切許旺酵母Candida tropicalis
擬康寧木霉Candida maltosa
微小鏈霉菌Wickerhamia fluorescens
藍(lán)色犁頭霉Rhodosporidium toruloides
釀酒酵母Lipomyces starkeyi
枯草芽孢桿菌Rhodotorula sinensis
花臉香蘑Saccharomyces cerevisiae
綠垂曲霉Pichia jadinii
披發(fā)糖多孢菌Candida rugosa
小鼠嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒β淀粉樣肽(1-28)抗體人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒卡巴他賽
小鼠皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒有絲分裂激B抗體人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒卡比多巴
小鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒軟骨蛋白聚糖抗體人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒卡枯
小鼠牛小腸堿性磷(CIAP)免疫試劑盒去整合樣金屬蛋白10抗體人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒卡維丁
MDM2/p53抑制劑(Nutlin 3b)DEAE纖維DE-23
其他二乙基乙基纖維23
英文名稱:DEAE cellulose DE-23
其他英文名稱:DEAE-Cellulose microgranular
產(chǎn)品規(guī)格:柱層析
包裝:100克
CAS號:9013-34-7
級別:柱層析
功能團(tuán):二乙乙基
正常PH范圍:2~9.5
小離子電量:0.88~1.08meg/dg(dg=dry gram,千克重)
蛋白容積:425mg/dg(蛋白體積是指0.01M ph8.5磷緩沖液—牛血清白蛋白)
蛋白容積/柱體積:60mg/ml
每升所需的離子交換劑㎏柱床體積:0.19(離子交換劑重量的數(shù)字考慮到溶脹,容易去除及使用過程中離子離子交換剩余顆粒)
填料密度:0.15dg/ml(填料密度的狀態(tài)為0.05M PH7.5磷緩沖液)
性狀:干燥纖維狀中等堿度陰離子交換劑,短纖維較少。游離堿型。容量 1.0mmol/g。典型吸收值 (胰島相對分子質(zhì)量12000)750mg/g、(牛血清蛋白)450mg/g。
用途:生化研究。用于柱色譜分析,用以分離提純多糖、肽、核苷、、血清組分和病毒等,陰離子交換填料
保存:RT