詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Oleanonic acid | 1mL(10mM)|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Oleanonic acid是一種三萜,可以抑制HIV-1對(duì)細(xì)胞的感染。起抑制HIV-1體外感染PBMC,自然感染PBMC和單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的EC50分別為22.7mM,24.6mM和57.4mM。除此之外,它可以抑制鼠腹腔白細(xì)胞產(chǎn)生白三烯B4,IC50為17μm。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):17990-42-0 別名:3-Oxooleanolic acid 純度:98.0% 分子量:454.68 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
阿姆斯特丹曲霉Saccharomyces cerevisiae
球毛殼Saccharomyces cerevisiae
多色青霉Saccharomyces cerevisiae
嗜熱脂肪地芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
云芝Saccharomyces cerevisiae
花生網(wǎng)斑病*Saccharomyces cerevisiae
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)Saccharomyces cerevisiae
Paraburkholderia sp.Saccharomyces cerevisiae
其他質(zhì)粒菌種Saccharomyces cerevisiae
黃曲霉Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
Chryseobacterium jejuenseSaccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌Saccharomyces cerevisiae
淡紫擬青霉Saccharomyces cerevisiae
小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體人腺病抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒雙草鹽
小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體人腺病抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒雙醋瑞因
小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒磷化Bcl-2抗體人旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA試劑盒雙氫
小鼠L解(PAL)免疫試劑盒磷化Bcl-2抗體人旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA試劑盒雙去氧基姜黃
HIV-1抑制劑(Oleanonic acid)5-尿苷二磷
其他尿苷-5′-二磷
英文名稱:5′-UDP
其他英文名稱:Uridine 5′-diphosphate
產(chǎn)品規(guī)格:超純,98%
包 裝: 100毫克/500毫克/1克
CAS號(hào):58-98-0
C9H14N2O12P2=404.16
級(jí)別:Ultra Pure Grade
含量:≥98.0%(HPLC)
氯化物:≤0.01%
重金屬:≤10ppm
性狀:粉末
用途:生化研究
保存:-20℃