培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
MK-6892是一種有效的選擇性煙酸(NA)受體GPR109A激動(dòng)劑。MK-6892作用于人GPR109A的Ki和EC50分別為4nM和16nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):917910-45-3 純度:99.07% 分子量:386.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
福氏志賀氏菌神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原)Anti-CCDC88A AntibodySciellin蛋白(SCEL)ELISA試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌重組生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制Anti-CCDC106 AntibodySATB同源框蛋白1(SATB1)ELISA試劑盒
總狀毛霉原變型神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原)Anti-CCL14 AntibodySarcosynapsin蛋白(SRYP)ELISA試劑盒
粗毛栓菌神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原)Anti-CCDC88A AntibodySalusinβ蛋白(Salusinβ)ELISA試劑盒
米曲霉促甲狀腺受體(抗原)Anti-CCL20 AntibodySalusinα蛋白(Salusinα)ELISA試劑盒
芽孢桿菌半胱蛋白8抗原Anti-CCL15 AntibodySaitohin蛋白(STH)ELISA試劑盒
芽孢桿菌屬促甲狀腺受體(抗原)Anti-CCL2(MCP-1) AntibodySacsin蛋白(SACS)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌酪羥化(抗原)Anti-CCL20 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)ELISA試劑盒
金色鏈霉菌微管蛋白(抗原)Anti-CCL27 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒
大腸埃希氏桿菌質(zhì)膜微囊蛋白-1抗原Anti-CCL3 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)ELISA試劑盒
釀酒酵母 β-連環(huán)蛋白抗原(β-β鏈接)Anti-CCL4L1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌磷化β-連環(huán)蛋白抗原Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)ELISA試劑盒
固氮菌微管蛋白(抗原)Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A5(S100A5)ELISA試劑盒
黃曲霉核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1(多肽)Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2)ELISA試劑盒
淺黃褐蠟傘組織蛋白B抗原Anti-CCNA2 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A14(S100A14)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌組織蛋白L抗原Anti-CCNB1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13)ELISA試劑盒
細(xì)胞膜鈣ATP4抗體越南伯克霍爾德氏菌小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
細(xì)胞膜鈣ATP4B抗體西伯利亞庫(kù)特氏菌人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞
細(xì)胞膜鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP抗體Viridibacillusarenosi小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體Rummeliibacillusstabekisii人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
煙酸(NA)受體GPR109A激動(dòng)劑(MK-6892)二甲基黃
其他甲基黃;對(duì)二甲基偶氮;奶油黃;溶劑黃2
英文名稱:Dimethyl yellow
其他英文名稱:N,N-Dimethyl-4-phenylazoaniline;N,N-Dimethyl-4-(phenylazo)benzenamine;C.I. Solvent yellow 2;p-Dimethylaminoazobenzene;Butter yellow;Oil yellow;C.I. 11020
產(chǎn)品規(guī)格:IND
包裝:25克/100克/500克
CAS號(hào):60-11-7
C14H15N3=225.29
級(jí)別:IND
pH變色域:2.9(紅)~4.0(黃)
熔點(diǎn):113~117℃
乙溶解試驗(yàn):合格
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.3%
性狀:磚紅色或棕紅色至暗棕色粉末。溶于水為藍(lán)紅色溶液帶微深綠色熒光,溶于乙為藍(lán)紅色溶液帶磚紅色熒光,在鹽中加溫時(shí)生成棕黃色沉淀,在氫氧化鈉中生成藍(lán)色沉淀,在濃硫中呈黃色溶液,加熱時(shí)不發(fā)生變化,稀釋時(shí)產(chǎn)生黃紅色沉淀。
用途:生化研究。生物染色。吸附指示劑。熒光指示劑。檢定汞。用于Mallory's 熒光桃紅-亞甲基藍(lán)染色;Kreyberg's 方法用于角質(zhì)和粘液
保存:RT