培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Rho抑制劑(Rhosin鹽酸鹽) | Rhosin hydrochloride | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg | 1~3天 |
商品介紹:
Rhosin鹽酸鹽是Rho特異性抑制劑,結(jié)合WT RhoA的Kd值為0.4uM,對(duì)Cdc42和Rac1作用無(wú)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1281870-42-5 純度:99.98% 分子量:394.86 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
構(gòu)巢曲霉Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRCIN1 Antibody高爾基蛋白73(GP73)ELISA試劑盒
草木樨中華根瘤菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRI Antibody干因子(SCF)ELISA試劑盒
雅致小克銀漢霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRI Antibody干擾誘導(dǎo)T-α亞族趨化劑(ITαC)ELISA試劑盒
分枝卷霉PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRP1/KPNA1 Antibody干擾調(diào)節(jié)因子9(IRF9)ELISA試劑盒
大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRSF3 Antibody干擾調(diào)節(jié)因子5(IRF5)ELISA試劑盒
釀酒酵母Cy3標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SSR3 Antibody干擾調(diào)節(jié)因子4(IRF4)ELISA試劑盒
灰樹(shù)花堿性磷(AP)標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRY Antibody干擾調(diào)節(jié)因子1(IRF1)ELISA試劑盒
東方伊薩酵母辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SSTR2 Antibody干擾ω(IFNω)ELISA試劑盒
短柄帚霉辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SRSF1 Antibody(PB0431)干擾κ(IFNκ)ELISA試劑盒
薄蓋靈芝堿性磷(AP)標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SSTR3 Antibody干擾ε(IFNε)ELISA試劑盒
米曲霉羅丹明標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SSX2 Antibody干擾γ誘導(dǎo)蛋白30(IFI30)ELISA試劑盒
殼梭孢屬(都不提供)FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-SSTR1 Antibody干擾γ誘導(dǎo)蛋白16(IFI16)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌膠體金標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-ST13 Antibody干擾γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)ELISA試劑盒
鉛黃腸球菌PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-ST13 Antibody干擾γ(IFNγ)ELISA試劑盒
粉紫小菇PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-ST7 Antibody干擾β(IFNβ)ELISA試劑盒
假絲酵母屬Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgGAnti-STAR Antibody干擾α8(IFNα8)ELISA試劑盒
谷受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體檸檬明串珠菌大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物
鈉鈣交換蛋白3抗體蒼白桿菌屬大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞提取物
NDUFAF4抗體鞘桿菌屬宮頸上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物
巰基氧化1抗體羅輪隱球酵母直腸上皮細(xì)胞和腫瘤原代細(xì)胞提取物
Rho抑制劑(Rhosin鹽酸鹽)鈣鎂試劑
其他3-羥基-4-[(2-羥基-5-基)偶氮]-1-萘磺;1-(1-羥基-4-甲基-2-偶氮)-2-萘酚-4-磺;鈣鎂指示劑
英文名稱:Calmagite
其他英文名稱:1-(1-Hydroxy-4-methyl-2-phenylazo)-2-naphthol-4-sulfonic acid;3-Hydroxy-4-(2-hydroxy-5-methylphenylazo)naphthalene-1-sulfonic acid
產(chǎn)品規(guī)格:IND
包裝:1克/5克/25克
CAS號(hào):3147-14-6
C17H14N2O5S=358.37
級(jí)別:IND
熔點(diǎn):≥330℃
UV absorption:λmax 602nm
性狀:暗褐色或黑色結(jié)晶粉末,不溶于水
性狀:綠色或黑色粉末,溶于水
用途:生化研究。
保存:RT