培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:UNC0642 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg UNC0642是有效地選擇性的G9a/GLP抑制劑,抑制G9a的IC50值小于2.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1481677-78-4 純度:99.89% 分子量:546.7 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
弗雷德里克斯堡假單胞菌上皮有絲分裂蛋白抗體Human EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) ELISA KIT犬S100B蛋白(S100B)免疫試劑盒
不吸水鏈霉菌Emerin蛋白抗體Human ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) ELISA KIT犬P選擇(SELP)免疫試劑盒
寄生孢外信號調(diào)節(jié)激5抗體Human ERN2 (Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE2) ELISA KIT犬P物質(zhì)受體(TACR1)免疫試劑盒
巨大曲霉磷/磷二酯家族成員5抗體Human EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) ELISA KIT犬N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒
禾粘座孢霉(或禾漆斑菌)早期生長反應(yīng)蛋白2抗體Human EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) ELISA KIT犬N端前心鈉肽(NT-ProANP)免疫試劑盒
鹽水鹽土生古菌磷化雌激受體β抗體Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KIT犬N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒
豬丹絲菌乙激β抗體Human ECHDC1 (Ethylmalonyl-CoA decarboxylase) ELISA KIT犬KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒
栗疫菌微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體Human ERRFI1(ERBB receptor feedback inhibitor 1) ELISA Kit犬I 型膠原蛋白免疫試劑盒
波恩佩島蒼黃色桿菌減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體Human EVPL (Envoplakin) ELISA KIT犬E選擇(SELE)免疫試劑盒
木霉延伸突觸蛋白2抗體Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT犬C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
膠孢延伸突觸蛋白1抗體Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KIT犬C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒
紅根須腹菌紅膜蛋白4.2抗體Human TYROBP(TYRO protein tyrosine kinase-binding protein) ELISA Kit犬CD8分子(CD8)免疫試劑盒
南類芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT犬CD6分子(CD6)免疫試劑盒
芽孢桿菌內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體Human ERRFI1(ERBB receptor feedback inhibitor 1) ELISA Kit犬CD4分子(CD4)免疫試劑盒
米串珠鐮孢環(huán)磷腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷交換因子1抗體Human DSCAM (Down syndrome cell adhesion molecule homolog) ELISA KIT犬CD31分子(CD31)免疫試劑盒
灰平鏈霉菌磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體Human EDARADD (Ectodysplasin-A receptor-associated adapter protein) ELISA KIT犬CC趨化因子受體2(CCR2)免疫試劑盒
: 10002資源名稱: 滄州擬諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%D-阿拉伯糖
: K85/39資源名稱: 西蘭地沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%L-組鹽鹽
亞鐵氧化硫桿狀菌Acidithiobacillus│ferrooxidans 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品L-組
G9a和GLP抑制劑(UNC0642)氯化金
其他 四水合氯金;四水合四氯絡(luò)金氫;四氯金;氯金水合物
英文名稱: Chloroauric acid hydrated
其他英文名稱: Hydrogen tetrachloroaurate(III) hydrate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,47.8%
包裝:1克
CAS號:27988-77-8
AuC13•HCl•4H2O=411.85
級別:AR
含量:≥47.8%
醚混合液溶解試驗(yàn):合格
堿金屬及其它金屬:≤0.2%
總氮量:≤0.01%
性狀:金黃色到帶紅黃色單斜結(jié)晶。極易吸濕潮解。易受日光影響。強(qiáng)熱分解成氯、氯化氫和金。易溶于水和乙,微溶于。相對密度約3.9。有刺激性。
用途:生化研究。銣、銫的微量測定。測定生物堿。照相業(yè)。紅色玻璃。鍍金等
保存:2~8℃