詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ML240 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
ML240是一個選擇性,ATO競爭的p97抑制劑,IC50值是100nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1346527-98-7 純度:99.49% 分子量:396.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
臭曲霉Burkholderia gladioli
惡疫霉*Pseudomonas syringae
埋藏曲霉Burkholderia multivorans
熱帶假絲酵母Pseudomonas putida
蘇云金芽孢桿菌Pseudomonas putida
展示接霉Pseudomonas fluorescens
半裸鐮孢菌Burkholderia pyrrocinia
阿富汗鏈霉菌Pseudomonas corrugata
釀酒酵母Pseudomonas marginalis
熱帶假絲酵母Pseudomonas fluorescens
球孢白僵菌Pseudomonas fluorescens
博伊丁假絲酵母Achromobacter xylosoxidans
運動節(jié)桿菌Pseudomonas syringae
小孢根霉須狀變種Ralstonia pickettii
伯克利邦氏孔菌Pseudomonas synxantha
美靈Pseudomonas viridiflava
磷化Smad2抗體牛分枝桿菌牛型亞種解單端孢菌微桿菌
磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體龜分枝桿菌龜膿腫亞種脫氮叢毛單胞菌
磷化細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體柯氏檸檬桿菌哈氏弧菌(原:鯊魚弧菌)
骨鈣蛋白/骨鈣抗體豬鼻支原體嚙齒類檸檬桿菌
p97抑制劑(ML240)L-甲基多巴
其他3-羥基-α-甲基-L-酪水合物;2-甲基-3-(3,4-二羥基基)-L-;3-(3,4-二羥基基)-2-甲基-L-;(-)-甲基多巴;(-)-3-(3,4-二羥基基)-2-甲基-L-
英文名稱:α-Methyl-L-DOPA
其他英文名稱:L-α-Methyl-DOPA;(?)-3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-2-methyl-L-alanine sesquihydrate
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克
CAS號:41372-08-1
C10H13NO4•1.5H2O=238.24
級別:BR
含量:≥99.0%
光學活性:?13°(c=1 in H2O)
性狀:粉末。熔點:≥300℃
用途:生化研究
保存:RT