培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
HUHS015在體內(nèi)體外都是PCA-1/ALKBH3強(qiáng)有力的抑制劑,持續(xù)的注射HUHS015能夠顯著的抑制DU145細(xì)胞的生長。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1453097-13-6 純度:99.77% 分子量:318.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
維羅納假單胞菌Bacillus thuringiensis雞層連蛋白/板層(LN)ELISA試劑盒
孟氏假單胞菌Bacillus thuringiensis雞17-類固(17-KS)ELISA試劑盒
單核增生李斯特氏菌Bacillus thuringiensis雞17-類固(17-KS)ELISA試劑盒
尖孢鐮刀菌Bacillus thuringiensis雞N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)ELISA試劑盒
大腸桿菌Bacillus thuringiensis雞N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)ELISA試劑盒
黃直絲鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
木賊鐮刀菌Bacillus thuringiensis雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
海洋桿菌Bacillus thuringiensis雞白介17(IL-17)ELISA試劑盒
維也納原小單孢菌Bacillus thuringiensis雞白介17(IL-17)ELISA試劑盒
干酪乳桿菌假植物亞種Bacillus thuringiensis雞1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒
抱川芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒
灰略紅鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
木霉菌Bacillus thuringiensis雞可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
稀疏鏈霉菌Bacillus thuringiensis禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒
植物乳桿菌Bacillus thuringiensis禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒
非洲馬瘟病(VII型)Bacillus thuringiensis鴨白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
造血細(xì)胞磷抗體長柄鏈格孢(煙草赤星病菌)假長雙歧桿菌
蛋白酪磷2抗體磚紅鐮孢明亮發(fā)光桿菌
細(xì)胞S期激相關(guān)蛋白2抗體變幻青霉產(chǎn)乙糖發(fā)酵菌
Smad4抗體束狀刺盤孢(束狀)路氏乳桿菌
PCA-1/ALKBH3抑制劑(HUHS015)L-天門冬鈣
其他L-天冬鈣;生力鈣
英文名稱:L-Aspartic acid calcium salt
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/1公斤
CAS號(hào):39162-75-9
C8H12CaN2O8=304.27
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
鈣含量:12.6~13.8%
PH:6.0~8.0
比旋光度:+21.8~+23.0°
干燥失重:≤0.25%
氯化物:≤200mg/kg
硫鹽:≤500mg/kg
銨鹽:≤200mg/kg
鐵:≤30mg/kg
重金屬:≤10mg/kg
砷鹽:≤1mg/kg
性狀:結(jié)晶或結(jié)晶粉末
用途:生化研究
保存:RT