商品介紹:
MK8033是ATP競爭性c-Met/Ron雙重抑制劑,對野生型c-Met的IC50為1nM,對c-Met N1100Y的IC50為2.0nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1001917-37-8 純度:98.0% 分子量:471.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
球孢白僵菌Leisingera nanhaiensis
枯草芽孢桿菌Lactococcus raffinolactis
HydrogenophagaLactococcus lactis subsp. lactis
香菇Leuconostoc mesenteroides
紫蓋蜜環(huán)菌Lishizhenia tianjinensis
小青霉Listeria innocua
白腐盾殼霉(可訂購)Listeria monocytogenes
土曲霉Listeria monocytogenes
ATCC 33217Listeria monocytogenes
pRSF Duet-1Listonella pelagius
發(fā)酵乳桿菌Loktanella hongkongensis
杏鮑菇Loktanella hongkongensis
厄氏菌Luteimonas mephitis
條紋雞樅Luteimonas terricola
臘狀芽胞桿菌Luteimonas terricola
棱柱散尾菌中華變型Lysinibacillus boronitolerans
小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體人N端前腦鈉(NT-proBNP)ELISA試劑盒格蘭地新
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體人N端前腦鈉(NT-proBNP)ELISA試劑盒格列脲
小鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒磷化雄激受體抗體人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒格列風(fēng)內(nèi)酯
小鼠血小板生成(TPO)免疫試劑盒磷化雄激受體抗體人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒格列喹
c-Met/Ron雙重抑制劑(MK-8033)D-α-基氧化
其他D-基氧化
英文名稱:D-AAO
其他英文名稱:D-α-amino acid oxidase
產(chǎn)品規(guī)格:生物技術(shù)級,1.5u/mg
包裝:100U
CAS號:9000-88-8
級別:BioChemika
活力:≥1.5u/mg
活力定義:One unit will oxidatively deaminate 1.0 μmole of D-alanine to pyruvate per minute at pH 8.3 at 25 °C, in the presence of a catalase
性狀:黃色粉末。是一種黃蛋白,由兩個相同的亞基所組成,每個亞基含有一個鐵原子。分子量:37000~38000Da
用途:生化研究。專一性催化D-型基。D-基氧化結(jié)合GL-7-ACA?;?在利用兩步法將CPC轉(zhuǎn)化為7-ACA過程中起主要作用。
保存:2-8℃