培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
LY2090314是一種有效的GSK-3抑制劑,能夠作用于GSK-3α和GSK-3β,IC50值分別為1.5nM和0.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):603288-22-8 純度:99.75% 分子量:512.53 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
丁梭菌凍干粉 金黃色葡萄球菌(陽性)蛋白酪磷PTPσ抗體Anti-ATOH1 Antibody白介17B(IL17B)ELISA試劑盒
豌豆根瘤菌ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體Anti-ATP11C Antibody白介17A(IL-17A)ELISA試劑盒
嗜熱毀絲霉神經(jīng)叢蛋白A3抗體Anti-ATP1A2 Antibody白介17(IL-17)ELISA試劑盒
沖擊地土地桿菌磷化蛋白酪磷1C抗體Anti-ATM Antibody白介16(IL-16)ELISA試劑盒
提純禽型結(jié)核菌絲/蘇蛋白磷4C抗體Anti-ATP2A1 Antibody白介15(IL-15)ELISA試劑盒
臘狀芽胞桿菌神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Anti-ATP2A3 Antibody白介13(IL-13)ELISA試劑盒
假單胞菌蛋白酪磷受體PCPTP1抗體Anti-ATP2A1 Antibody白介12受體亞基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)ELISA試劑盒
易變鏈霉菌植烷酰羥化2相互作用蛋白抗體Anti-ATP2A2 Antibody白介12受體(IL-12R)ELISA試劑盒
釀酒酵母旁瘤抗原MA1抗體Anti-ATP4B Antibody白介12(IL-12/P70)ELISA試劑盒
灰橙鏈霉菌大腦蛋白1抗體Anti-ATP2A2 Antibody白介12(IL-12/P40)ELISA試劑盒
pY26TEF-GPD@1核糖核結(jié)合蛋白2抗體Anti-ATP7A Antibody白介12(IL-12)ELISA試劑盒
球孢白僵菌磷化過氧化活化增生受體γ抗體 PPARγAnti-ATP5MC1 Antibody白介11(IL-11)ELISA試劑盒
松針散斑殼早老蛋白1+2抗體Anti-ATRX Antibody白介10(IL-10)ELISA試劑盒
米曲霉豬藍(lán)耳病病抗體Anti-ATP7B Antibody白介1(IL-1)ELISA試劑盒
青霉磷酯Cβ2抗體Anti-ATP5PD Antibody(PB0281)白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒
紫色鏈霉菌硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體Anti-AURKA Antibody白蛋白(ALB)ELISA試劑盒
太平洋硫膨大桿菌Thioclava│pacifica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)Verticillium│dahliae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定
GSK-3抑制劑(LY2090314)甲亞胺鹽-H
其他 水合偶氮次甲基-H一鈉鹽;甲亞胺鹽-H單鈉鹽水合物
英文名稱: Azomethine-H monosodium salt hydrate
其他英文名稱: 4-Hydroxy-5-(salicylideneamino)-2,7-naphthalenedisulfonic acid monosodium salt;4-Hydroxy-5-(2-hydroxybenzylideneamino)-naphthalene-2,7-disulfonic acid monosodium salt hydrate
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 1克/5克
CAS號(hào):206752-32-1
C17H12NNaO8S2•xH2O=445.40 (anhydrous basis)
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):≥300℃
性狀:橙色粉末。溶于NAOH
用途:生化研究。
保存:RT