培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Formestane(CGP-32349;4-OHA)是I型芳香酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):566-48-3 別名:CGP-32349;4-OHA;4-OHAD 純度:99.87% 分子量:302.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
凍土毛霉凍土變型Escherichia coli小鼠Toll樣受體4(TLR4)ELLSAelisa試劑盒
雙孢小雙孢菌Escherichia coli小鼠新生甲狀腺elisaelisa試劑盒
根瘤菌屬Escherichia coli小鼠新生甲狀腺elisaelisa試劑盒
星狀諾卡氏菌Escherichia coli小鼠血管緊張Ⅰelisaelisa試劑盒
小孢根霉須狀變種Escherichia coli小鼠血管緊張Ⅰelisaelisa試劑盒
綠淀粉鏈霉菌Escherichia coli大鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
草青霉Escherichia coli大鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
阿伯丁沙門氏菌Escherichia coli大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒
釀酒酵母Escherichia coli大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒
線蟲被毛孢Escherichia coli大鼠P選擇(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒
疏棉狀嗜熱霉Escherichia coli大鼠P選擇(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒
傳染性支氣管炎病Escherichia coli大鼠活化A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒
土曲霉原變種Escherichia coli大鼠活化A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒
諾卡氏菌Escherichia coli大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
栗酒裂殖酵母Escherichia coli大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
冠突曲霉Escherichia coli大鼠血小板生成(TPO)ELISA試劑盒
鈉離子/牛磺膽共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體圍小叢殼菌豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞
神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體山楊黑星孢人胸腺激缺陷細(xì)胞
分化相關(guān)基因NDRG1抗體殼菌VERO細(xì)胞衍生株
跨膜受體蛋白Notch-1抗體殼皮鯉魚尾鰭細(xì)胞
I型芳香酶抑制劑(Formestane)β-乳球蛋白
英文名稱:β-Lactoglobulin from bovine milk
產(chǎn)品規(guī)格:BR,90%
包裝:250毫克/1克
CAS號(hào):9045-23-2
級(jí)別:BR
含量 :≥90% (PAGE)
性狀:冷凍干燥粉末。相對(duì)分子質(zhì)量 35000~42000。含β-乳球蛋白A和B,能用色譜法分離。在瓊脂電泳上可分離出β1和β2兩種組分。溶于水和中性氯化鈉稀溶液。等電點(diǎn)pI 5.1~5.2。比旋光度[α]25D-30.4°(乙鹽緩沖液中,pH 4.8,μ=0.1)。 A1%1cm, 280nm9.3
用途:生化研究。蛋白質(zhì)的物理化學(xué)研究。有機(jī)分子結(jié)合研究。SDS電泳用的非糖蛋白分子量標(biāo)志。遺傳學(xué)和病理研究。遺傳標(biāo)志制備的原材料。
保存:2~8℃