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詳細(xì)介紹
組織來源：正常支氣管組織
種屬來源：兔
細(xì)胞簡(jiǎn)介：平滑肌即無紋肌的通稱，平滑肌是由長(zhǎng)紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官，而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素（肌層）。平滑肌細(xì)胞互相連接，形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官；在功能上可以通過縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動(dòng)和變形，也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮，使器官對(duì)抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀。
支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過程有關(guān)．如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發(fā)病時(shí)，可以檢測(cè)到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大，表型也發(fā)生改變，由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型，并分泌多種與細(xì)胞因子；而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象。
培養(yǎng)基：原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
兔支氣管平滑肌細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2014 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
兔支氣管平滑肌細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞 | 豬小腸黏膜上皮細(xì)胞 |
神經(jīng)生長(zhǎng)因子β重組兔單克隆抗體 | PE-Cy5標(biāo)記的DNAJB8蛋白抗體 |
兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的SNX27蛋白抗體 |
兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的生長(zhǎng)激抗體 |
兔胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的膜相關(guān)蛋白17抗體 |
兔羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的長(zhǎng)波長(zhǎng)敏感的視蛋白抗體 |
兔臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的TRAF4相關(guān)因子1抗體 |
豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的線粒體絲氨蛋白抗體 |
豬II型肺泡上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的環(huán)指蛋白127抗體 |
豬肺成纖維細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的LIN7B蛋白抗體 |
豬心肌成纖維細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的環(huán)氧合2/前列腺內(nèi)過氧化物合成2單克隆抗體 |
豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 兔支氣管平滑肌細(xì)胞PE-Cy5標(biāo)記的雌激受體相關(guān)蛋白α抗體 |
豬主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的磷化核仁磷蛋白抗體 |
豬頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的磷化絲氨/蘇氨蛋白激MST4,MST3,STK25抗體 |
豬胸腺成纖維細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的絲氨蛋白45抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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