詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
GW0742 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
GW0742(GW610742)是一種有效的高度選擇性PPARδ激動劑,作用于PPARδ,-α,和-γ受體,EC50值分別為1nM,1.1μM and2μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:317318-84-6 別名:GW610742 純度:99.63% 分子量:471.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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總狀橫梗霉磷脂磷水解1抗體Anti-BID Antibodyβ半乳糖苷(βGAL)ELISA試劑盒
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黑木耳蛋白酪磷H1抗體Anti-BID Antibodyβ4整合(ITG β4/CD104)ELISA試劑盒
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錳氧化褐黃海水菌磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-BIRC3 Antibodyβ2整合(ITG β2/CD11+CD18)ELISA試劑盒
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芽孢桿菌PALM3抗體Anti-BID Antibody(PB0015)β2微球蛋白(MGβ2)ELISA試劑盒
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蕓薹鏈格孢(可訂)磷吡哆氧化抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA試劑盒
海泥鼠尾菌Muricauda│lutimaris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
苛求芽孢桿菌Bacillus│fasridiosus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
耶羅威亞解脂酵母Yarrowia│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
高度PPARδ激動劑(GW0742)甲基異基甲
其他 3-甲基-2-?。?-甲基??;1,1-二甲基;甲基異基;異基甲基甲;3-甲-2-丁
英文名稱: MIPK
其他英文名稱: 3-Methyl-2-butanone;Isopropyl methyl ketone;Methyl isopropyl ketone
產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%
包 裝: 250毫升
CAS號:563-80-4
C5H10O=86.13
級別:BR
含量:≥99.0%(GC)
相對密度:0.802~0.807
折光率:1.386~1.389
性狀:無色液體。有氣味。易溶于乙,極微溶于水。易燃。中等毒,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)148mg/kg。有刺激性。熔點:92℃;沸點:94-95℃;閃點:-3℃
用途:生化研究。溶劑。有機合成。塑料工業(yè)
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