化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X2013 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 正常支氣管組織 | 種屬來源 | 兔 |
詳細介紹
兔支氣管上皮細胞
培養(yǎng)基：原代上皮細胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：氣管以軟骨、肌肉、結(jié)締組織和粘膜構(gòu)成。軟骨為"C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。
支氣管(bronchi)，是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。
氣管管壁分黏膜，黏膜下層和外膜三層。
黏膜表面為假復層纖毛柱狀上皮，由纖毛細胞、杯狀細胞、基細胞、刷細胞和彌散的神經(jīng)內(nèi)分泌細胞等組成。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 兔支氣管上皮細胞 | 商品貨號 | A01X2013 |
組織來源 | 正常支氣管組織 | 種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 鋪路石狀，不規(guī)則細胞 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠骨細胞 | 豬睪丸支持細胞 |
微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體 | PE-Cy5標記的促性腺激釋放激受體抗體 |
豬腎小管上皮細胞 | PE-Cy5標記的磷化Ephrin B抗體 |
豬腎小球系膜細胞 | PE-Cy5標記的細胞色C氧化亞基3抗體 |
豬膀胱上皮細胞 | PE-Cy5標記的人類皰疹病毒8 G蛋白偶聯(lián)受體抗體 |
豬膀胱平滑肌細胞 | PE-Cy5標記的增強型青色熒光蛋白單克隆抗體 |
豬前列腺成纖維細胞 | PE-Cy5標記的Gasdermin D蛋白抗體 |
豬輸尿管成纖維細胞 | PE-Cy5標記的1號染色體開放閱讀框192抗體 |
豬甲狀腺上皮細胞 | PE-Cy5標記的FOXJ3蛋白抗體 |
豬垂體細胞 | PE-Cy5標記的T淋巴細胞易位蛋白2抗體 |
豬胸腺基質(zhì)細胞 | PE-Cy5標記的淋巴限制膜蛋白Jaw1抗體 |
豬腎上腺髓質(zhì)細胞 | 兔支氣管上皮細胞PE-Cy5標記的四分子交聯(lián)體16抗體（四旋蛋白） |
豬胰腺導管上皮細胞 | PE-Cy5標記的肌球蛋白9B抗體 |
豬胰腺腺泡上皮細胞 | PE-Cy5標記的脂肪成熟因子1抗體 |
豬鼻腔粘膜上皮細胞 | PE-Cy5標記的粘蛋白17抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)